WWW.DISUS.RU

БЕСПЛАТНАЯ НАУЧНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, методички

 


На правах рукописи

Маняхин Артем Юрьевич

Шлемник байкальский (Scutellaria baicalensis Georgi) на юге

Приморского края (интродукция, состав флавоноидов,

биологическая активность)

03.02.14 – биологические ресурсы

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Владивосток 2010

Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Горнотаежной станции им.

В.Л. Комарова Дальневосточного отделения РАН

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Зориков Петр Семенович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор, чл.-корр. РАН Васьковский Виктор Евгеньевич кандидат биологических наук Ухваткина Ольга Николаевна

Ведущая организация: Федеральное Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Дальневосточный государственный аграрный университет, г. Благовещенск

Защита диссертации состоится "12" мая 2010 г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 005.005.02 в Учреждении Российской академии наук Тихоокеанском институте биоорганической химии Дальневосточного отделения РАН по адресу: 690022, г.

Владивосток, проспект 100 лет Владивостоку, 159, ТИБОХ ДВО РАН.

Тел.: 8(4232)31-14- Факс: 8(4232)31-40- E-mail: komand@piboc.dvo.ru

С диссертацией можно ознакомиться в филиале Центральной научной библиотеки ДВО РАН (библиотеке Тихоокеанского института биоорганической химии ДВО РАН г.

Владивосток, пр-т. 100 лет Владивостоку, 159). Текст автореферата размещен на сайте совета http://www.piboc.dvo.ru Автореферат разослан 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат химических наук, доцент Н.А. Командрова 1.

Общая характеристика работы

Актуальность темы. Известно, что из произрастающих на Земле высших растений лишь около 10-15 % исследовано на наличие биологически активных веществ. Такие исследования требуют серьезного вложения материальных средств. Поэтому первостепенное значение приобретают анализ информации уже накопленной в академической и народной медицине о растениях; разработка системного подхода к изучению лекарственного растительного сырья, рациональное использование дикорастущих и культивируемых растений. Требуется реализация новых подходов в создании фитопрепаратов, внедрение современных физико-химических методов их стандартизации [Завражнов, 1993].

В современной фармацевтической науке существует ряд критериев для оценки лекарственного растительного сырья. С одной стороны, научные исследования химического состава растений показывают широкие возможности получения веществ или лекарственных препаратов с различной фармакологической активностью. С другой стороны, используемая технология переработки растительного сырья, как правило, ориентирована на получение только одного целевого продукта. Сложившаяся на сегодняшний день практика промышленной переработки сырья очень часто не отражает степень его изученности. Преодоление этого противоречия, возможно путем внедрения новых подходов к оценке качества сырья и использования комплексных ресурсосберегающих технологий. Предпосылкой для внедрения таких технологий является изучение химического состава лекарственных растений, условий их произрастания, основных физико-химических свойств биологически активных соединений, разработка наиболее подходящих методик экстракции этих веществ.

Шлемник байкальский (Scutellaria baicalensis Georgi, сем. Lamiaceae) является одним из примеров нерационального использования сырья. Истощение запасов природного сырья, массовое исчезновение популяций дикорастущего растения под антропогенным прессом, постоянный рост спроса промышленности и населения на сырье этого растения вызывает необходимость введения сырья в культуру и более полного и комплексного его использования. [Бухашеева, Асеева, 2002].

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явилось изучение биологических особенностей S. baicalensis в условиях культивирования и природной популяции с оценкой перспективы его выращивания в условиях юга Приморского края как источника растительных полифенолов, а также разработка методов определения качественного и количественного содержания биологически активных веществ и максимального извлечения суммы флавоноидов из сырья.

Для достижения поставленной цели исследования были определены следующие задачи:

1) изучить биоморфологические особенности и ритм сезонного развития S. baicalensis в условиях культивирования на юге Приморского края;

2) сравнить биоморфологические показатели, семенную продуктивность и биопродуктивность растений из природных популяций и выращенных в условиях интродукции;

3) изучить особенности накопления байкалина и других полифенольных соединений в подземных и надземных органах растения при выращивании в условиях юга Приморского края и природных популяциях;

4) определить оптимальные условия экстракции флавоноидов из корней (способ экстракции, тип растворителя, соотношение сырье - экстрагент, температура и продолжительность экстракции);

5) определить качественный и количественный состав флавоноидов в экстрактах;

6) исследовать биологическую активность флавоноидов культивируемого S. baicalensis на экспериментальных животных.

Научная новизна работы.

Впервые проведено изучение состояния агропопуляции S. baicalensis на юге Приморского края (Хасанский район, окрестности пос. Краскино) и показано, что растение характеризуется высоким содержанием байкалина и других полифенольных соединений. Изучены биологические и морфологические особенности развития интродуцента (семенная продуктивность и урожайность). Изучена динамика накопления и распределения по органам растения полифенолов в условиях юга Приморского края и научно обоснованы оптимальные сроки заготовки сырья. Впервые исследована возрастная структура природной популяции (Октябрьский район, окрестности с. Чернятино)..

Исследована биологическая активность полифенолов культивируемого сырья.

Практическая ценность. Разработаны методы интродукции S. baicalensis на юге Приморского края. Даны рекомендации по выращиванию и использованию интродуцента.

Разработана схема экстракции без использования токсичных растворителей.

Материалы диссертации используются в технологической схеме культивирования S.

baicalensis, образовательном процессе при решении вопросов экологического воспитания и образования школьников и студентов края, а также для организации просветительной работы с населением. На основании проведенных исследований, решением Государственной комиссии РФ по испытанию и охране селекционных достижений, S.

baicalensis включен в Государственный реестр селекционных достижений, допущенных к использованию как «Шлемник байкальский Муссон».

Апробация работы. Результаты исследований были представлены на Всероссийской научной конференции «Состояние лесов Дальнего Востока и актуальные проблемы лесоуправления» [Хабаровск, 2009]; 10-й международной очно-заочной научнопрактической конференции студентов, аспирантов и молодых исследователей «Интеллектуальный потенциал вузов - на развитие Дальневосточного региона и стран АТР» [Владивосток, 2008], 2-ой международной конференции «Химия, технология и медицинские аспекты природных соединений» [Казахстан, 2007]; всероссийской.

конференции молодых ученых «Экология в современном мире: взгляд научной молодежи» [Улан-Удэ, 2007], 11-ой всероссийской конференции «Экосистемы, организмы, инновации» [Москва, 2009].

Публикации По материалам диссертации опубликовано 9 научных работ, в том числе 4 статьи в рецензируемых журналах, входящих в список ВАК.

Структура и объем Работа изложена на 134 страницах, содержит 22 рисунка, 18 таблиц и 6 приложений.

Диссертация состоит из введения, 3 глав, выводов, списка используемой литературы ( источников, в том числе 162 на русском языке и 97 на иностранных).

Глава 2. Материалы и методы Полевые исследования по интродукции популяции S. baicalensis проводились на базе открытого акционерного общества «Юбиком» (Приморский край, Хасанский район).

Природная популяция изучалась в окрестностях с. Чернятино Октябрьского района Приморского края общепринятыми методами [Зайцев, 1972; Кузнецова, 1974; Миркин и др., 2000; Морозова и др., 1997; Муравьева, 1991; Пименова и др., 1998].

Изучение семенной продуктивности и урожайности проводили как описано в литературе [Методические..., 1980; Положий и др., 1988].

Экстракты готовили с использованием воды и различных концентраций этилового спирта (0-96 %), варьировали параметры времени, температуры, соотношения сырье :

экстрагент, степени измельчения сырья. По окончанию экстрагирования экстракт оставляли охлаждаться до комнатной температуры. Для проведения ультразвуковой экстракции нами использовалась УЗ ванна «Сапфир» с термостатом. Время воздействия ультразвука - 15 мин первичного озвучивания для активного проникновения экстрагента в сырье и непосредственное время ультразвуковой экстракции в течение 20; 30; 40 минут, при комнатной температуре. Вакуум-фильтрацию проводили на установке ПВФ 47/ (Россия). Полученные экстракты высушивали с помощью сублимационной сушки Martin Christ Alpha 1-2 (Германия).

Количественное определение байкалина и других полифенольных соединений в сухом экстракте проводили методом обращено-фазовой высоко эффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на хроматографе Shimadzu LC-10VP (Япония). Идентификацию пиков байкалина проводили, сравнивая время удержания стандарта с хроматограммами испытуемых растворов образца. Концентрацию байкалина определяли по стандартной программе для хроматографа с учетом влажности стандарта и образцов.

Методы исследования биологической активности экстрактов S. baicalensis на экспериментальных животных. В работе использовали 80 белых беспородных половозрелых мышей-самцов массой 20-25 г, 63 беспородных крыс-самцов с исходной массой тела 140-160 г. Животных содержали в стандартных условиях вивария на стандартном пищевом рационе, при свободном доступе к воде и естественном световом режиме с соблюдением всех правил и международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных работах [European…, 1986] и разрешения комиссии по биомедицинской этике при Горнотаежной станции ДВО РАН. При разделении животных на группы проводили ранжирование по массе тела и возрасту.

Влияние техногенного загрязнения моделировали на мышах. Для этого добавляли в их пищу в течение 20 дней по 1 г на особь в день измельченных листьев липы (Tilia amurensis Rupr.) из двух районов г. Владивостока с различным уровнем техногенного загрязнения (ТЗ). Уровень загрязнения в районе с минимальной техногенной нагрузкой (Ботанический сад) составлял по значению индекса загрязнения атмосферы (ИЗА) величину 2,58, тогда как в районе с максимальной техногенной нагрузкой (Луговая, г.

Владивосток) ИЗА составлял 6,3 [Ежегодный…,2008]. Животные были разделены на группы по 10 особей в каждой. В 1-ой (фоновое техногенное загрязнение) группе животным в пищу добавляли листья липы из района с минимальным техногенным загрязнением; во 2-й (максимальное техногенное загрязнение) группе – в пищу добавляли листья липы из района с максимальным техногенным загрязнением; в 3-й опытной группе – в пищу добавляли листья липы из района с максимальным техногенным загрязнением + сухой экстракт шлемника (10 мг/кг); 4-й опытной группе в пищу добавляли листья липы из района с максимальным техногенным загрязнением + препарат сравнения - 1 мл/кг ранее изученного в нашей лаборатории экстракта патринии скабиозолистной (ЭПС) (Patrinia scabiosifolia Fisch. ex Link) [Зорикова, Хасина, 2005].

Алкогольный гепатит вызывали у крыс контрольной и опытной групп введением в желудок 40% этилового спирта по 0,7 мл на 100 г массы крыс 1 раз в сутки в течение дня [Мансурова, Олимова, 1985]. Животным опытной группы вводили в желудок сухой экстракт шлемника байкальского (СЭШБ) в дозе 10 мг/кг в водном растворе объема 1мл, 1 раз в день на протяжении 21 дня. Интервал между введениями СЭШБ и этанола соответствовал 5-6 часам. Животные интактной группы получали в соответствующем объеме дистиллированную воду.

О степени антиоксидантной эффективности СЭШБ судили по следующим показателям: активность перекисное окисление липидов (ПОЛ) контролировали посредством определения содержания малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови и гомогенате печени по методу И. Д. Стальной и Г. Г. Гаришвили [1977], каталазную активность сыворотки крови определяли методом Г. А. Бабенко, М. Н.

Гайнацкого [1976] на 7, 14 и 21-е сутки эксперимента. Статистическая обработка полученных данных проведена с использованием критерия Стьюдента.

Физиологические методы исследования СЭШБ в дозе 10 мг/кг в водном растворе объема 1мл, вводили животным (группа 3) в желудок через зонд. Контрольные группы мышей получали соответствующий объем дистиллированной воды (группа 1 и 2) или препарат сравнения (группа 4) – жидкий экстракт патринии скабиозолистной (ЭПС) в дозе 1 мл/кг по аналогичной схеме.

Для исследования ориентировочно-двигательной активности (ОДА) применяли тест «открытое поле» (ОП) Время наблюдения за поведением мыши - 5 минут. В поведении животного выделяли следующие визуально идентифицируемые поведенческие акты:

пересечение диаметров (пробеги), пересечение окружностей (переходы), число актов груминга и замирания, число стоек с опорой на стенки и без опоры. После 5 минут исследования животное возвращали в клетку и тщательно протирали пол после каждого теста.

Метод исследования поведения в приподнятом крестообразном лабиринте (ПКЛ) основан на безусловно-рефлекторном страхе падения с высоты и открытых пространств у грызунов [Dawson, Tricklebank, 1995]. Время, проведенное в открытых рукавах ПКЛ, обратно пропорционально уровню тревожности. Таким образом, чем выше показатель предпочтения открытых рукавов лабиринта закрытым, тем ниже уровень тревоги у животных и наоборот. В ходе эксперимента животное помещали на центральную площадку лабиринта и в течение 5 минут визуально регистрировали его поведенческие акты. Рассчитывали индексы тревожного поведения. Эти показатели являются стандартными в методике оценки тревожности лабораторных животных. Чем ниже показатели, тем выше тревожность и наоборот [Воронина, Островская, 1998].

Глава 3. Результаты и обсуждение 3.1. Условия интродукции.

Интродукционные площадки располагались в Хасанском районе Приморского края, окрестности пос. Краскино (42° 44 с.ш., 130° 46 в.д.). Для агрохимической характеристики смешанных образцов почвы были выполнены следующие анализы:

содержание гумуса, актуальная кислотность, обменная кислотность, гидролитическая кислотность, содержание подвижных форм фосфора и калия.

Все определения выполнены для трех проб почвы. В табл. 1 представлены средние значения агрохимических характеристик. Пробы 1, 2, 3 соответствуют интродукционным участкам: 1 – уклон 3, высокий уровень грунтовых вод; 2 – уклон до 6, высокая минерализация почвы; 3 – отсутствие уклона, средний уровень грунтовых вод.

3.2. Биологические и морфологические особенности развития интродуцента При подзимнем сроке посева проростки появляются в середине апреля, при весеннем – в третьей декаде апреля, на 14-16 день после посева.

Опадание семядолей означает переход особей шлемника в ювенильное стояние.

Для ювенильных особей характерно наличие одного осевого побега, несущего 5-6 пар настоящих листьев, не отличающихся по морфологическим особенностям от листьев проростков и взрослых растений, но увеличивающихся по размерам в акропетальной последовательности. В ювенильном состоянии побег достигает 10-12 см высоты.

Стержневой корень проникает в почву на глубину 3-5 см. Главный побег продолжает моноподиальное нарастание, достигает 25-40 см высоты и несет до 18-20 пар листьев.

Число боковых побегов 1-го порядка увеличивается до 6-8 пар. На боковых побегах 1-го порядка, образовавшихся из почек, находившихся 4-5-й пары листьев, формируются побеги 2-го порядка. В течение первого года жизни 100% особей переходят из прегенеративного состояния в генеративное. Однолетние особи зацветают в конце лета (в августе), образуют полноценные семена. Осенью, к концу сентября, на корневой шейке закладываются почки возобновления, из которых в следующем году развиваются новые побеги.

Двулетние особи несут вегетативные и генеративные почки, которые трогаются в рост рано весной. Массовое отрастание отмечено в третьей декаде апреля. Из почек развиваются однолетние побеги, несущие одну весенне-летне-осеннюю генерацию листьев. В конце апреля молодые побеги достигали длины 5-7 см с 4-6 парами листьев, длиной 4,0-1,2 см, ширины 0,15-1,3 см. В последующем наблюдается интенсивный рост побегов и формирование растения. Через месяц растения достигали 30-40 см высоты, а диаметр - 50-60 см, количество побегов было в пределах 40-60 шт. Цветение начиналось 15-20 июля, т.е. в среднем через 70 дней после массового отрастания. Массовое цветение отмечено в конце июля (27.07.), в эту фазу особи достигли максимальной высоты до см. Распускание цветков происходило в акропетальном направлении с центрального побега, вслед за которым распускались цветки из с соцветий на боковых побегах порядка, а затем и 2 порядка. Продолжительность цветения S. baicalensis составляла 60- дней. Период созревания семян отмечен в конце августа. Фаза созревания семян не зависит от возраста генеративных растений. Возраст генеративных растений не влияет на сроки наступления и прохождения фенологических фаз, в то время как метеорологические условия вегетационного периода могут сдвинуть сроки прохождения отдельных фаз развития. Вслед за распусканием цветков на центральном побеге распускаются цветки соцветий на боковых побегах 1-го порядка, затем 2-го порядка. Длительность цветения одного цветка 2-5 дней, фаза цветения около 60-70 дней.

Период образования семян и их созревания примерно равен периоду цветения (55дней). Длительность фазы созревания семян не зависит от возраста генеративных растений и сроков посева (подзимнего и весеннего). Форма и положение чашечки цветка в период созревания семян не меняются по сравнению с фазой цветения, окраска же ее становится темно-фиолетовой. Из четырех эрем, находящихся в ценобиях, созревают от до 4. К концу октября, с наступлением заморозков, побеги вместе с листьями отмирают.

В таком состоянии растения зимуют. Вегетационный период длится 225-300 дней.

3.3. Семенная продуктивность и урожайность S. baicalensis в культуре и природной популяции В вегетационный сезон 2008 г. было проведено обследование агро- и природной популяций S. baicalensis. У культивируемых растений зафиксированы следующие показатели: среднее число семян в коробочке 2,7 ± 0,005, среднее число генеративных побегов на 1 растение 6,73 ± 0,03. Потенциальная семенная продуктивность на генеративный побег составляет 251,25 ± 14,6 шт., реальная – 168,99 ± 11,9 шт. Наличие полноценных семян – один из основных показателей соответствия условий произрастания биологическим потребностям вида. Это положение подтверждается высоким коэффициентом семенной продуктивности интродуцента, который равен 67%, что свидетельствует о хорошей адаптации вида к условиям культивирования.

В природной популяции S. baicalensis в вегетационный период 2008 г среднее число семян в коробочке было равно 2,2 ± 0,005, число генеративных побегов на растение - 4,32 ±0,03. Потенциальная семенная продуктивность растения составляет 123,76±10,3 шт., реальная – 64,8±15,7 шт. Коэффициент семенной продуктивности в природной популяции несколько ниже, чем в культуре и составляет 52,4%.

Качество семян определяется размерами, массой 1000 штук и проверкой на всхожесть. В результате исследования природной популяции оказалось: величина семян составляет 1,8±0,01 мм; масса 1000 семян 1,27±0,05 г. Для культивируемых растений аналогичные показатели равны, соответственно: 2,35±0,01 мм и 1,83±0,03 г. Установлено, что в результате интродукции линейные размеры семян возросли на 30,6 %, вес – 44,1 %.

Для установления ценности полученных при культивировании семян как посевного материала проведены опыты по определению лабораторной всхожести семян. При температуре 25° С прорастание семян начиналось на 3 сутки после закладки. Энергия прорастания семян на 5 день в группе без периода покоя составила 37%, у семян годовой выдержки - 32%, лабораторная всхожесть на 10-е сутки равнялась, соответственно 52 и 41%. Анализ значений энергии прорастания и всхожести семян S. baicalensis показал, что при хранении указанные показатели несколько снижаются, приближаясь к показателям природных популяций.

Нами была определена урожайность надземных и подземных частей S. baicalensis на трех интродукционных площадках и в дикой популяции (табл. 2). Наибольшая плотность генеративных особей отмечена на площадке 3, но при этом эксплуатационный запас корней на данном участке является самым низким. Максимальная урожайность корней приходится на площадку 2 при минимальной плотности посадки.

Сырьевые ресурсы S. baicalensis в условиях интродукции и природной популяции Модельная Плотность роста, Эксплуатационный Эксплуатационный площадка площадка площадка популяция 3.4. Накопление флавоноидов в условиях культивирования и в природной популяции хроматографическим методом показали, что в течение сезона качественный состав фенольных соединений остается постоянным, хотя количественно их характеристики изменяются. Количественная ВЭЖХ показала изменение содержания основного флавоноида – байкалина по фенологическими фазами. Максимальное содержание его (14,9 % от абс. сух. сырья) приходилось на весенний период. В фазу цветения (июльавгуст) содержание байкалина в корнях значительно снижалось – до 5,5 %. В начальный осенний период, в фазе формирования семян, количество байкалина несколько увеличивалось (8,3%), и по мере созревания семян продолжало возрастать, хотя и не достигло максимума. В конце октября, к завершению вегетационного цикла, содержание флавоноида в корнях еще более увеличивалось, и приближалось к максимальным значениям (12,5 %).

Определение возрастной динамики накопления флавоноидов проведено на образцах сырья 2- и 3-го года интродукции. Результаты анализа, отраженные в таблице 3, выявили, что на фоне сезонной изменчивости, описанной выше, видно увеличение содержания флавоноидов с возрастом растений.

Для растений 3-го года содержание байкалина в фазы начала вегетации на 23,4 %;

цветения – 26,8 %; диссеминации – 46,8 %; конца вегетации – 36,5 % больше, чем в соответствующие фазы растений 2-го года вегетации. Для минорных флавоноидов, в аналогичные фазы, увеличение составляло 14,7 %; 44,3 %; 42,1 %; 21,9 % соответственно.

Накопление суммы флавоноидов на 3-м году интродукции по сравнению с показателями 2-го года возросло на 19,7 %; 34,0 %; 44,7 %; 30,3 % в соответствии с фенофазами.

Динамика накопления флавоноидов S. baicalensis в условиях интродукции (%, w/w) 2- год, начало 3-.год, начало 2-й год, 3-й год, вегетации 3-й год, конец Результаты изучения содержания флавоноидов в различных органах растений свидетельствуют о различиях отдельных частей растений по составу и содержанию этих соединений. Исследование распределения флавоноидов по органам S. baicalensis проводили на сырье, собранном в фазу диссеминации, когда количество флавоноидов в корнях растений приближается к максимальным значениям. Исследование показало (рис.

1), что главный флавоноид – байкалин – в основном содержится в подземных органах, ценным сырьем является как основной корень, так и его нижние и верхние мелкие боковые корни, которые часто удаляют при заготовках сырья.

Рис. 1. Содержание байкалина в органах растения, % от сух. сырья Так как в стеблях содержание байкалина достаточно мало, их использование в качестве сырья не представляется рациональным.

Приведенные данные по анализу культивируемых растений показали, что наибольшее количество флавоноидов в корнях S. baicalensis наблюдается в фазах начала и завершения вегетации у растений 3-го года вегетации. Накопление основного флавоноида – байкалина происходит в подземной части растения, причем во всех частях корня.

Сумма флавоноидов в природном сырье составляет 18,4% от сухого веса, минорных флавоноидов – 10,3%. Таким образом, сопоставляя эти данные с показателями для растений в фазе цветения, можно видеть, что в условиях культуры накопление основного флавоноида – байкалина, возрастает более чем в два раза, тогда как на накопление минорных флавоноидов процесс интродукции оказал менее выраженное воздействие.

3.5. Изучение процесса экстракции корней шлемника байкальского и получение сухого экстракта С целью установления оптимальных параметров процесса экстракции сырья – корней интродуцированного шлемника байкальского и максимально полного извлечения целевых веществ провели исследование процесса экстракции в различных режимах.

Экспериментально установленные оптимальные параметры (табл. 4) были применены для получения сухого экстракта корня S. baicalensis.

Сухой экстракт шлемника байкальского (СЭШБ) представляет собой коричневый порошок с характерным запахом и горьковато-вяжущим вкусом. Порошок гигроскопичен, при влажности экстракта выше 4% теряется сыпучесть и начинается комкование.

Оптимальные параметры экстракции сырья корня S. baicalensis Для определения качественного и количественного состава СЭШБ применяли метод ВЭЖХ. Результаты показаны в табл. 5. Экстракт содержал 16% целевого вещества – байкалина, что превышает стандартные требования к качеству экстрактов из природного сырья – 10 % [Лекарственное…, 2006], полный набор минорных флавоноидов составлял 11,9 % и общая сумма флавоноидов – 27,9 %.

Содержание флавоноидов (байкалина и минорных) в сухом экстракте корня культивированного шлемника байкальского (%w/w) Скутел Байкал Норвог Орозил Вогони Байкале Вогони Хризин Общ.

Масса сухого экстракта (сумма экстрактивных веществ), полученная из 30 г корня составляла 12,81 г, это соответствует 42,7 % от взятой для экстрагирования навески. Этот показатель превосходит стандартные требования по извлечению из корней шлемника не менее 30 % экстрактивных веществ [Лекарственное…, 2006].

Ультразвуковой (УЗ) метод экстракции показал результаты, сходные с традиционным методом. Содержание байкалина составило 16,2 % – 16 % при экстракции.

Степень извлечения минорных флавоноидов так же близка к полученной при обычной экстракции (11,9 %). Это свидетельствуют о пригодности УЗ метода экстракции, бесспорным преимуществом которого является существенное снижение времени экстракции – с 4 часов до 40–60 минут.

3.6 Технологическая схема получения сухого концентрата флавоноидов из шлемника байкальского, выращенного на юге Приморского края С любезного предложения технологической лаборатории Unigen Korea, дочерней фирмы корпорации Econet, была предоставлена для апробации на выращенном сырье технологическая схема получения концентрата флавоноидов (рис. 2).

Все ранее подобранные оптимальные параметры процесса экстракции были введены в основу балансовой загрузки, на основании которой проводилась апробация предложенной схемы.

Экстрагирование и выделение суммы флавоноидов из водного экстракта корней S.

baicalensis проводилось по следующей схеме:

• Измельчение растительного сырья • Получение суммы экстрактивных веществ В результате переработки 1050 г измельченного сырья было получено 220 г сухого концентрата флавоноидов, что достаточно близко к расчетным показателям – 234, грамм.

Рис. 2. Схема процесса выделения суммы флавоноидов из корней шлемника байкальского Сухой концентрат флавоноидов представляет собой зеленовато-желтый порошок без запаха, с горьким вкусом. Порошок гигроскопичен, комкуется. Исследование качественного и количественного состава концентрата (табл. 6), показало наличие всего спектра идентифицируемых флавоноидов, как гликозилированных, так и агликонов.

Количество суммарных флавоноидов составляет 94,7% для образца 1, и 94,8% для образца 2, что говорит о высокой чистоте полученного продукта. При этом, содержание байкалина в обоих случаях составляло не менее 70%.

Содержание флавоноидов (байкалин и минорные) в концентрате 2- год, начало 3-год, начало Применение технологии, предложенной «Unigen Korea», показало, что сырье выращенное в Хасанском районе Приморского края на базе ОАО «Юбиком», окрестности пос. Краскино, содержит достаточное количество целевых соединений (флавоноидов) и пригодно для создания концентратов высокого качества. Разработанная нами технология на базе корейской с оптимизацией некоторых стадий процесса позволяет практически исчерпывающе извлекать биологически активные вещества из сырья, что, несомненно, способствует рационному использованию биоресурсов, и, косвенно, сохранению природных популяций S. baicalensis.

3.7. Биологическая активность сухого экстракта шлемника байкальского из интродуцированного сырья Методом «открытого поля» (ОП) исследовали влияние экстракта шлемника байкальского (ЭШБ) на интегративные этологические реакции лабораторных мышей. Как видно из данных, представленных в табл. 7, введение ксенобиотиков вызывает у особей 2й контрольной группы – максимальное техногенное загрязнение (МТЗ) достоверное изменение всех этологических показателей.

Действие ЭШБ при сочетанном действии с ТЗ на этологические реакции в в лунки



Похожие работы:

«УДК 628.953.2 Середа Олеся Васильевна ОДНОМОДОВЫЕ СВЕТОВОДЫ ИЗ КРИСТАЛЛОВ ГАЛОГЕНИДОВ СЕРЕБРА ДЛЯ СРЕДНЕГО ИНФРАКРАСНОГО ДИАПАЗОНА 01.04.21 Лазерная физика АВТОРЕФЕРАТ диссертация на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук Научный руководитель к.ф.-м.н. Бутвина Л.Н. Москва. 2008г. Работа выполнена в...»

«БОНДАРЕНКО Александр Сергеевич АУТЭКОЛОГИЯ И МИГРАЦИОННАЯ АКТИВНОСТЬ МАССОВЫХ ВИДОВ ЖУЖЕЛИЦ (COLEOPTERA, CARABIDAE) НАГОРНОЙ ЧАСТИ СЕВЕРО-ЗАПАДНОГО КАВКАЗА 03.02.08 – экология (биологические наук и) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Краснодар – 2013 Работа выполнена на кафедре фитопатологии, энтомологии и защиты растений факультета защиты растений ФГБОУ ВПО Кубанский государственный аграрный университет Научный руководитель :...»

«Высоцкая Марианна Сергеевна Между логикой и парадоксом: композитор Фарадж Караев Специальность 17.00.02 музыкальное искусство АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени доктора искусствоведения Москва 2012 1 Работа выполнена в Московской государственной консерватории имени П. И. Чайковского на кафедре теории музыки. Научный консультант : доктор искусствоведения, профессор Григорьева Галина Владимировна, профессор кафедры теории музыки Московской государственной...»

«ТЕРЕХИН Александр Александрович МАТЕМАТИЧЕСКОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ ОТРЫВА ТУРБУЛЕНТНОГО ПОГРАНИЧНОГО СЛОЯ ПРИ ОБТЕКАНИИ ЛЕТАТЕЛЬНЫХ АППАРАТОВ 05.13.18 – математическое моделирование, численные методы и комплексы программ АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук ЧЕЛЯБИНСК – 2009 Работа выполнена на кафедре Двигатели летательных аппаратов Южно-Уральского государственного университета. доктор технических наук, доцент Научный руководитель :...»

«КВАСОВ Игорь Евгеньевич ЧИСЛЕННОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ ВОЛНОВЫХ ПРОЦЕССОВ В ГЕТЕРОГЕННЫХ ТВЕРДЫХ ДЕФОРМИРУЕМЫХ СРЕДАХ Специальность 05.13.18 – Математическое моделирование, численные методы и комплексы программ АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук МОСКВА – 2011 Работа выполнена на кафедре информатики Московского физико-технического института (государственного университета) Научный руководитель : доктор физико-математических наук,...»

«ЛАКСАЕВА Елена Анатольевна ЗАВИСИМОСТЬ НАКОПЛЕНИЯ ПЛОДАМИ ОБЫКНОВЕННОЙ ИРГИ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ОТ ЭКОЛОГИЧЕСКОЙ СИТУАЦИИ И ИХ ВЛИЯНИЕ НА СОСТОЯНИЕ ЖИВОТНЫХ 03.02.08 - экология 03.01.04- биохимия АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук 2011г Работа выполнена в ГОУ ВПО Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова и ФГОУ ВПО Российский государственный аграрный заочный университет Научный...»

«Вилков Сергей Владимирович Имиджевые технологии на выборах регионального уровня в современной России Специальность 23.00.02 – политические институты, этнополитическая конфликтология, национальные и политические процессы и технологии (по политическим наук ам) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата политических наук Саратов 2006 Диссертация выполнена на кафедре политических наук ГОУВПО Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского Научный...»

«Терентьева Людмила Казимировна ИНОЯЗЫЧНАЯ ЛЕКСИКА И ЕЕ АДАПТАЦИЯ В ДОКУМЕНТАХ ЦЕРКОВНОГО И АДМИНИСТРАТИВНОГО ДЕЛОПРОИЗВОДСТВА XVIII В. г. ТОБОЛЬСКА Специальность 10.02.01 – Русский язык АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата филологических наук Челябинск – 2012 Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Тобольская государственная социально-педагогическая академия им Д.И....»

«КРИВОЛУЦКАЯ Надежда Александровна ЭВОЛЮЦИЯ ТРАППОВОГО МАГМАТИЗМА И Pt-Cu-Ni РУДООБРАЗОВАНИЕ В НОРИЛЬСКОМ РАЙОНЕ Специальность 25.00.11 - геология, поиски и разведка твердых полезных ископаемых; минерагения Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора геолого-минералогических наук Москва – 2012 г. 1 Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Ордена Ленина и Ордена Октябрьской революции Институте геохимии и аналитической химии им. В.И. Вернадского РАН...»

«ЦЕЛИЩЕВ Антон Владимирович МЕТОДИКА РАСЧЕТА И МОДЕЛИРОВАНИЯ ПРОЦЕССА ФАЗОРАЗДЕЛЕНИЯ ГАЗОЖИДКОСТНОГО ПОТОКА В ПРОТИВОТОЧНОЙ ВИХРЕВОЙ ТРУБЕ Специальность 05.04.13 - Гидравлические машины и гидропневмоагрегаты АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Уфа – 2012 Работа выполнена в ФГБОУ ВПО Уфимский государственный авиационный технический университет на кафедре сопротивления материалов. заслуженный деятель науки РФ, Научный руководитель :...»

«Тараева Галина Рубеновна Семантика музыкального языка: конвенции, традиции, интерпретации Специальность 17.00.02 – Музыкальное искусство Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора искусствоведения Ростов-на-Дону – 2013 Работа выполнена в Ростовской государственной консерватории (академии) им. С. В. Рахманинова Официальные оппоненты : Казанцева Людмила Павловна, доктор искусствоведения, профессор кафедры истории и теории музыки Астраханской государственной...»

«Луконина Оксана Игоревна МАКСИМИЛИАН ШТЕЙНБЕРГ: ЛИЧНОСТЬ И ТВОРЧЕСТВО В КОНТЕКСТЕ ОТЕЧЕСТВЕННОЙ КУЛЬТУРЫ ПЕРВОЙ ПОЛОВИНЫ ХХ ВЕКА Специальность 17.00.02 – Музыкальное искусство Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора искусствоведения Ростов-на-Дону – 2013 Работа выполнена в Ростовской государственной консерватории (академии) им. С. В. Рахманинова Научный консультант : доктор искусствоведения, профессор Казанцева Людмила Павловна Официальные оппоненты :...»

«МАКАРОВ Андрей Сергеевич АЛГОРИТМЫ КОНТРОЛЯ И ДИАГНОСТИКИ СИСТЕМ УПРАВЛЕНИЯ АВИАЦИОННЫМИ ГТД НА ОСНОВЕ НЕЙРОСЕТЕВЫХ МОДЕЛЕЙ И НЕЧЕТКОЙ ЛОГИКИ Специальность: 05.13.01 Системный анализ, управление и обработка информации (в промышленности) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Уфа – 2011 Работа выполнена в ФГБОУ ВПО Уфимский государственный авиационный технический университет на кафедре вычислительной техники и защиты информации Научный...»

«Луховицкий Лев Всеволодович ОСНОВНОЕ БОГОСЛОВСКО-ПОЛЕМИЧЕСКОЕ СОЧИНЕНИЕ ПАТРИАРХА НИКИФОРА КОНСТАНТИНОПОЛЬСКОГО APOLOGETICUS ATQUE ANTIRRHETICI: ОПЫТ КОМПЛЕКСНОГО ИСТОРИКО-ФИЛОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА Специальность 10.02.14 – классическая филология. Византийская и новогреческая филология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата филологических наук Москва 2010 Работа выполнена на кафедре византийской и новогреческой филологии филологического факультета...»

«Железов Роман Владимирович РАЗРАБОТКА И ИССЛЕДОВАНИЕ ИНФОРМАЦИОННОСПРАВОЧНОЙ СИСТЕМЫ ПОИСКА ОПТИМАЛЬНЫХ ПУТЕЙ ПРОЕЗДА НА ПАССАЖИРСКОМ ТРАНСПОРТЕ Специальность 05.12.13 – Системы, сети и устройства телекоммуникаций. АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Москва – 2009 Работа выполнена на кафедре телекоммуникационных сетей и систем в Московском физико-техническом институте (государственном университете). Научный руководитель : доктор...»

«УДК 622. 233. 63. 051.78:622. 235. 527. 4 Жариков Сергей Николаевич ВЗАИМОСВЯЗЬ УДЕЛЬНЫХ ЭНЕРГЕТИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК ПРОЦЕССОВ ШАРОШЕЧНОГО БУРЕНИЯ И ВЗРЫВНОГО РАЗРУШЕНИЯ МАССИВА ГОРНЫХ ПОРОД Специальность 25.00.20 - Геомеханика, разрушение горных пород, рудничная аэрогазодинамика и горная теплофизика Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата технических наук Екатеринбург 2011 Работа выполнена в Институте горного дела Уральского отделения Российской...»

«ЛЕВАШОВ Алексей Николаевич ПРИМЕНЕНИЕ СЕЛЕКТИВНОЙ ФОТОХРОМОТЕРАПИИ СИНИМ СВЕТОМ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ 14.00.51 — восстановительная медицина, лечебная физкультура и спортивная медицина, курортология и физиотерапия 14.00.26 — фтизиатрия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Санкт-Петербург 2009 Диссертация выполнена в Государственном образовательном учреждении дополнительного профессионального образования...»

«Попов Александр Игоревич МАТЕМАТИЧЕСКИЕ МОДЕЛИ И КОМПЛЕКС ПРОГРАММ ДЛЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ БИОМЕДИЦИНСКИХ СИГНАЛОВ ИНФРАНИЗКОЧАСТОТНОГО ДИАПАЗОНА Специальность: 05.13.18 – Математическое моделирование, численные методы и комплексы программ АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Петрозаводск – 2010 Работа выполнена в Поморском государственном университете имени М.В. Ломоносова. Научный руководитель : доктор технических наук,...»

«ХАЧАТУРЯН БОРИС ГРИГОРЬЕВИЧ ФОРМИРОВАНИЕ И РАЗВИТИЕ ИНСТИТУТА МЕСТНОГО САМОУПРАВЛЕНИЯ НА ДАЛЬНЕМ ВОСТОКЕ РОССИИ: ОБЩЕЕ И ОСОБЕННОЕ (последняя четверть XIX – начало XXI вв.) Специальность 07.00.02 – Отечественная история АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени доктора исторических наук Иркутск 2013 г. Работа выполнена на кафедре политологии и истории федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования Иркутский...»

«ЯНОВ Владимир Иванович ОСОБЕННОСТИ ФОРМИРОВАНИЯ УРОЖАЯ РАЗНЫХ ВИДОВ ПОЛЫНИ И НАУЧНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ ВОЗДЕЛЫВАНИЯ ПОЛЫНИ ЭСТРАГОННОЙ НА СВЕТЛО-КАШТАНОВЫХ СОЛОНЦЕВАТЫХ ПОЧВАХ СЕВЕРО-ЗАПАДНОГО ПРИКАСПИЯ 06.01.01 – Общее земледелие АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора сельскохозяйственных наук Ставрополь – 2012 Работа выполнена в ФГБОУ ВПО Калмыцкий государственный университет в 1991–2008 гг. Научный консультант : доктор сельскохозяйственных наук...»










 
2014 www.av.disus.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.