WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

АКАДЕМИЯ НАУК МОЛДОВЫ

ИНСТИТУТ ГЕНЕТИКИ И ФИЗИОЛОГИИ РАСТЕНИЙ

На правах рукописи

УДК: 616-005.1:575.113+

575.174.015.3+577.21

МОКАН ЕЛЕНА

ЭФФЕКТИВНОСТЬ МОЛЕКУЛЯРНЫХ МАРКЕРОВ

В ОПРЕДЕЛЕНИИ ГЕНЕТИЧЕСКОГО РИСКА

ИШЕМИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА

03.00.15 – ГЕНЕТИКА

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологии КИШИНЕВ, 2012

Работа выполнена в лаборатории Молекулярной Генетики Института Генетики и Физиологии растений Академии наук

Республики Молдова

Научный руководитель: БАРБАКАР Николае доктор хабилитат, профессор, 03.00.15 – Генетика

Научный консультант: ЛЫСЫЙ Леонид доктор хабилитат, профессор 03.00.04 – Биохимия

Официальные оппоненты:

ДУКА Мария, член-корреспондент АНМ, доктор хабилитат, профессор САКАРЭ Виктория, доктор, конференциар Члены специализированного ученого совета:

ЛУПАШКУ Галина, председатель, доктор хабилитат, конференциар КОТЕНКО Евгения, секретарь, доктор, конференциар ИСТРАТИ Валериу, доктор хабилитат, профессор ФОКША Валентин, доктор хабилитат, конференциар ЧЕМОРТАН Игорь, доктор, конференциар

Защита состоится 14 декабря 2012 г. в 900 часов на заседании специализированного научного Совета D 10.03.00.15-16 при Институте Генетики и Физиологии растений Академии Наук Молдовы по адресу: MD2002, ул. Лесная, 20, г. Кишинев, Республика Молдова. e-mail:

igfp_asm@yahoo.com.

С диссертацией и авторефератом можно ознакомиться в Научно-центральной библиотеке «А. Лупан» Академии наук Молдовы (ул. Академическая 5, MD 2028, г. Кишинев) и на вебстранице CNAA (www.cnaa.md).

Автореферат разослан 10 ноября 2012 г.

Ученый секретарь специализированного научного Совета КОТЕНКО Евгения доктор биологии Научный руководитель:

БАРБАКАР Николае доктор хабилитат биологии, профессор Научный консультант:

ЛЫСЫЙ Леонид доктор хабилитат медицины, профессор Автор МОКАН Елена © Mocan Elena,

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы В соответствии с международными эпидемиологическими исследованиями в мире от инсульта ежегодно умирают около 6 млн. человек, из них 25% больных умирает в течение первого месяца и около 40% в первый год [1, 3, 14, 16]. В большинстве стран инсульт занимает 2–3 место в структуре общей смертности населения. Республика Молдова занимает одно из лидирующих мест по смертности от цереброваскулярных заболеваний среди стран Европы [1, 3]. Ишемический инсульт (ИИ), самая частая форма острых нарушений мозгового кровообращения (около 80-85%), обусловлен недостаточностью кровоснабжения определнного участка головного мозга по причине снижения мозгового кровотока, тромбоза или эмболии, связанных с заболеваниями сосудов, сердца и крови. По данным Национального Центра менеджмента в медицине, каждый год в стране регистрируются около 50 тысяч пациентов с диагнозом острого нарушения мозгового кровообращения. При общей распространенности сердечно-сосудистых заболеваний 145 случаев на 10 тысяч жителей, частота инсульта соответствует 31 случай [3]. Важнейшей задачей профилактической кардиоваскулярной медицины является идентификация факторов риска развития сосудистых нарушений, включающих атеросклероз, ишемическую болезнь сердца, инсульт и их сочетанное проявление с учетом этнических, гендерных и других индивидуальных различий [3, 5, 8, 16]. Это позволит выявить вероятность развития, тяжесть течения заболевания, разработать профилактические мероприятия с учетом индивидуальных особенностей каждого больного.

Описание ситуации в области и определение задач исследования. Последние 20 лет активно развиваются ассоциативные исследования о генетически детерминированной предрасположенности, как к инсульту, так и другим комплексным заболеваниям.

Ассоциативные методы базируются на двух методологических подходах: анализ генетических ассоциаций на основе выявленного полиморфизма генов-кандидатов болезни и широкомасштабный геномный ассоциативный анализ (GWAS) [5, 7, 10, 12, 16]. Развитие методов высокопроизводительного генотипирования привело к использованию сотен и тысяч полиморфных маркеров в рамках одного исследования. Так, в 2008 году был запущен грандиозный проект «1000 геномов», направленный на изучение генетической изменчивости при массовом секвенировании. В результате чего было обнаружено более 15 млн.

однонуклеотидных замен (SNP – single nucleotide polymorphism), 55% которых описаны впервые, 1 млн. коротких инсерций-делеций (Indel) и около 20 тыс. крупных вариаций числа копий генов (CNV – copy number variation). Было определено, что в среднем каждый человек является носителем 250-300 аллелей типа «потери функции» и 50-100 аллелей, вовлечены в наследственные заболевания [5, 7, 16, 23]. В настоящее время активно дискутируется проблема «недостающей наследственности» в этиологии комплексных болезней и небольшой эффект SNP в качестве маркеров заболеваний [7]. Кроме того, результаты о новых маркерах по GWAS плохо воспроизводятся и характеризуются противоречивыми данными вследствие выраженных межэтнических различий частот распределения аллелей и генотипов [7, 11, 16]. Исследования «случай-контроль» позволяют оценить риск развития заболевания у конкретного индивида, но известно, что вклад различных генов в формирование генетической предрасположенности к патологиям существенно различается в разных популяциях. При вычислении генетического риска для пациента требуется информация о распределении частот аллелей и генотипов для популяции, которой он принадлежит, что затрудняет использование данных, полученных для других популяций [5]. Таким образом, необходимость проведения аналогичных исследований для каждой крупной популяции не вызывает сомнений.

Все перечисленное послужило мотивацией для выполнения предложенного исследования генетической предрасположенности к ишемическому инсульту в популяции Республики Молдова. Рассмотренный нами паттерн маркеров ИИ включал как редкие полиморфные варианты с высокой пенетрантностью, так и широко распространенные аллели с низкой пенетрантностью. Среди редких полиморфных вариантов изучен вклад мутационных аллелей генов F2 (rs1799963), F5 (rs6025) и минорных аллелей генов GP1BA (rs2243093), PDE4D (rs152312). Из числа общих вариантов рассматривались распространенность инсерционноделеционного полиморфизма гена АСЕ (rs4646994), минорных аллелей локусов rs PDE4D, rs10507391/rs9551963 ALOX5AP и rs1799768 PAI-1 [27].

Цель работы: оценка эффективности полиморфных вариантов генов-кандидатов в качестве маркеров ишемического инсульта в популяции Республики Молдовы.

Задачи исследования:

1. Проанализировать распространенность полиморфных вариантов генов-кандидатов F2, F5, GP1BA, PAI-1, ACE, ALOX5AP и PDE4D в исследуемых выборках.

2. Определить ассоциации полиморфных вариантов генов, кодирующих компоненты системы свертывания, фибринолиза, эндотелиальной функции и воспаления, с ишемическим инсультом.

3. Исследовать взаимосвязь полиморфных вариантов генов-кандидатов с уровнем показателей артериального давления, метаболизма липидов и глюкозы в зависимости от возраста и 4. На основе изучения моделей взаимодействия генов F2, F5, GP1BA, PAI-1, АСЕ, ALOX5AP и оценить значимость ключевых генов в формировании наследственной предрасположенности к ишемическому инсульту.

5. Описать характер влияния курения, поведенческого фактора риска развития ишемического инсульта, на взаимодействие между генами-кандидатами.

Научная новизна: Впервые проведен комплексный анализ наследственной предрасположенности к ишемическому инсульту в популяции Республики Молдова. На основе результатов выявлены функционально значимые полиморфные локусы генов-кандидатов, гендерная гетерогенность полученных ассоциаций и описан вклад некоторых модификационных и немодификационных факторов.

Получены данные о частотах аллелей и генотипов полиморфных локусов генов:

rs1799963 F2, rs6025 F5, rs2243093 GP1BA, rs1799768 PAI-1, rs4646994 АСЕ, rs10507391 и rs9551963 ALOX5AP, rs2910829 и rs152312 PDE4D в популяции Республики Молдова.

Оценена степень генетической изменчивости при помощи показателей фактической гетерозиготности и соответствие закону Харди-Вайнберга.

Выявлена ассоциация полиморфизма гена АСЕ с ишемическим инсультом у мужчин до 56 лет и SNP локуса rs10507391 гена ALOX5AP у женщин.

Показано, что гаплотип АС, в состав которого входят аллели А локуса rs10507391 и аллель С локуса rs9551963 гена ALOX5AP, является рисковым для развития ишемического инсульта. Носительство гаплотипа АС статистически значимо ассоциируется с изменением уровня триглицеридов, липопротеинов высокой плотности и возрастом у больных ишемическим инсультом.

Описаны межгенные взаимодействия и выявлено, что при курении меняется тип межгенного взаимодействия.

Решенная научная проблема: описано влияние исследуемых полиморфных вариантов генов F2, F5, GP1BA, PAI-1, АСЕ, ALOX5AP, PDE4D и некоторых модификационных факторов риска (курение, показатели метаболизма липидов и глюкозы) на предрасположенность ишемическому инсульту в зависимости от возраста и пола в популяции Республики Молдова.

Теоретическая значимость. Представленные данные расширяют знание о распределении частот полиморфных вариантов генов F2, F5, GP1BA, PAI-1, АСЕ, ALOX5AP и PDE4D в популяции Республики Молдова.

Научно-практическая значимость работы. Полученные данные молекулярногенетического анализа вносят вклад в понимание наследственной предрасположенности к ишемическому инсульту. Результаты исследования особенностей ассоциации генетических маркеров с инсультом в зависимости от пола могут быть использованы для медикогенетического консультирования. С целью раннего выявления лиц с высоким риском развития сосудистых заболеваний мозга и проведения донозологической профилактики рекомендуется выявлять носительство аллелей D гена ACE для мужчин и A локуса rs10507391 гена ALOX5AP для женщин.

Положения, выносимые на защиту 1. Предложен 4-локусный паттерн полиморфных локусов, состоящий из rs4646994 ACE (Ins>Del), rs9551963 ALOX5AP (A>C), rs2910829 PDE4D (G>A), rs1799768 PAI-1 (5G>4G), ассоциированный с высоким риском ишемического инсульта в популяции Республики Молдова.

2. Для мужчин молодого и среднего возраста D аллель и DD генотип гена ACE является маркером повышенного риска развития ишемического инсульта. У носителей DD генотипа выявлены повышенные концентрации триглицеридов и липопротеинов очень низкой плотности в сыворотке крови.

3. Однонуклеотидный полиморфизм rs10507391 гена ALOX5AP ассоциирован с ишемическим инсультом у женщин старше 56 лет.

4. Гаплотип АС, в состав которого входят аллели А локуса rs10507391 и С локуса rs гена ALOX5AP, ассоциирован с повышением уровня триглицеридов и понижением концентрации липопротеинов высокой плотности с возрастом и определяет повышение риска развития ишемического инсульта.

Внедрение научных результатов: результаты распределения частот полиморфных вариантов исследуемых генов используются при определении сердечно-сосудистого риска в молодой популяции РМ, а также могут быть использованы в ходе преподавания медицинской и клинической генетики, биохимии, патофизиологии, внутренних болезней в вузах медицинского и биологического профиля, а также в рамках курсов повышения квалификации медицинских работников.

Апробация работы. Материалы данного исследования были представлены на: IX Международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов» (Москва, 2004); IX Международной конференции молодых ученых (Кишинев, 2006); Международной Конференции «Генетика в России и мире» (Москва, 2006); EMBO/EMBL Symposium “Human Variation: Cause and Consequence (Heidelberg, 2010); 9th CRG Annual Symposium «Medical Genome Sequencing: Understanding the Genomes of Disease» (Barcelona, 2010); XXIVth National Conference of the Romanian Society of Physiological Sciences. (Oradea, Baile Felix, 2010); XXV-a Conferin Naional a Societii Romne de Fiziologie (Trgu Mure, 2011); 12th International Congress of human genetics and the American Society of human genetics 61st annual meeting (Montreal, 2011); Second Advanced Summer School in Africa «Nutrition and Disease. Biochemical and Molecular Insights» (Cape Town, 2012); The 13th International meeting on Human Genome Variation and Complex Genome analysis (HGV2012) (Shanghai, 2012); The 3rd International Symposium on Adipobiology and Adipopharmacology (Bulgaria, 2012).

Публикации. Полученные результаты опубликованы в 21 научной работе (включая 7 в моноавторстве), из которых 5 статей и 16 тезисов докладов на национальных и международных форумах.

Структура и объем работы. Материалы диссертационной работы изложены на страницах и включают введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследования, результаты и обсуждение, обобщение полученных результатов, общие выводы и рекомендации. Список литературы включает 178 источников. Диссертация иллюстрирована рисунками и 23 таблицами, содержит 8 приложений.

Ключевые слова: ишемический инсульт, генетическая предрасположенность, молекулярный маркер, полиморфизм ДНК, межгенные взаимодействия, ген-средовые взаимодействия.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

В Введении обоснована актуальность предложенных к решению в диссертации проблем, определены цель и соответствующие ей задачи работы, отмечены научно-практическая значимость полученных результатов, выводы сформулированы в основных положениях, выносимых на защиту.

Глава 1. СОВРЕМЕННАЯ КОНЦЕПЦИЯ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К

КОМПЛЕКСНЫМ ЗАБОЛЕВАНИЯМ – ИШЕМИЧЕСКИЙ ИНСУЛЬТ

В обзоре литературы рассматриваются современные представления о генетической структуре заболеваний человека, представленной различными типами полиморфизма ДНК.

Изложены данные о генетической предрасположенности к инсульту, представлено описание исследованных полиморфных вариантов генов-кандидатов, кодирующих компоненты системы свертывания, фибринолиза, воспаления и вазоконстрикции [2, 4, 5, 10, 17, 21]. Описана комплексная оценка влияния генетических факторов и факторов среды на риск возникновения ишемической болезни и обозначены механизмы, посредством которых факторы внешней среды способны спровоцировать патологические изменения. Представлены мотивации для выполнения предложенного исследования о вкладе полиморфизма в развитие ишемического инсульта в популяции Республики Молдова. На основании изученных литературных источников были сформулированы цели и задачи диссертационной работы.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ В качестве материала использовали 154 сыворотки крови и 248 препаратов геномной ДНК пациентов (159 человек) с ишемическим инсультом и индивидов (89 человек) без сопутствующих аутоиммунных и сердечно-сосудистых заболеваний популяции Республики Молдова. Методология включала применение клинико-функциональных, биохимических и молекулярно-генетических (ПЦР и ПЦР в реальном времени технологии TaqMan®).

Последовательности праймеров и зондов к каждому из полиморфных вариантов исследуемых генов были подобраны сотрудниками отдела Молекулярных основ генетики человека под руководством д.б.н., профессора Лимборской С. А. в Институте Молекулярной Генетики РАН.

Работа была проведена в рамках институционального проекта 06.407.006F; индивидуальных грантов 08-04-90902 РФФИ и CRDF/MRDA project MYSSP-1403 и стипендии WFS.

Описание количественных признаков проводилось при помощи вычисления среднего значения, а качественных признаков – вычисления частот. Сравнение групп по количественным признакам проводилась при помощи параметрического дисперсионного анализа, а сравнение групп по качественному признаку при вычислении показателей отношения шансов, чувствительности и специфичности и регрессионного логистического анализа [21].

Статистическая обработка данных выполнялась с помощью прикладных программ StatDirect, GraphPad InStat. Вероятностные гаплотипы определялись программами PLINK и Phase2.1. Тип и силы межгенного взаимодействия оценивались при помощи непараметрического кластерного анализа MDR [17].

Глава 3. АССОЦИАЦИЯ ПОЛИМОРФНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНОВ-КАНДИДАТОВ

С ИШЕМИЧЕСКИМ ИНСУЛЬТОМ

3.1. Анализ распространенности полиморфных вариантов генов-кандидатов В связи с тем, что распределение частот аллелей исследуемых полиморфных вариантов данных генов в популяции Республики Молдова рассматривалось впервые, для каждого локуса был проведен анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфных вариантов геновкандидатов ишемического инсульта для оценки степени генетической изменчивости. Для этого был определен уровень фактической гетерозиготности по каждому локусу и соответствие равновесному распределению Харди-Вайнберга (см. рис. 3.1).

Установлены низкая распространенность мутантных аллелей генов F2, F5, минорных аллелей генов GP1BA, rs152312 PDE4D и максимальные показатели гетерозиготности полиморфных вариантов генов АСЕ, PAI-1, ALOX5AP и rs2910829 PDE4D. Определено, что распределение частот аллелей генов F2, F5, GP1BA, PAI-1, ALOX5AP, PDE4D соответствовало ожидаемым закону равновесия Харди-Вайнберга (р>0,05), тогда как в контрольной выборке для I/D полиморфизма гена АСЕ распределение частот аллелей и генотипов не соответствовало данному закону (р0,05).

В связи с тем, что исследуемые локусы rs10507391 (TA) и rs9551963 (CA) находятся в одном гаплоблоке А гена ALOX5AP при помощи программы Phase2.1 были определены вероятностные гаплотипы. На рисунке 3.2 представлены результаты распределения частот гаплотипов в исследуемых группах.

Таблица 3.3. Распределение частот аллелей полиморфизма гена ALOX5AP OR – отношение шансов; ДИ – доверительный интервал; 2 – критерий хи-квадрат для таблиц сопряженности 2х2; n – объем выборки; р – достигнутый уровень значимости.

Примечание: ИИ – группа больных ишемическим инсультом.

В расчетах показателей использована мультипликативная модель наследования (d.f.=1).

Так, частота гаплотипа ТС в группе контроля соответствовала 51,4%, тогда как в группе больных ИИ – 42,8%. Гаплотип ТА в группе контроля встречался с частотой 21,5%, а в группе больных ИИ – 25,6%, и, соответственно, гаплотип АА – 21,2% и 16,6%. Частота гаплотипа АС в группе больных была выше почти в 3 раза, чем в группе контроля, соответственно, 15,0% и 5,9% (рT) с низкой степенью воспроизводимости CVC=4/10 и 2=10, (р=0,0013). 3-х локусная модель из локусов rs10507391 ALOX5AP (T>A), rs9551963 ALOX5AP (A>C) и rs2910829 PDE4D (G>A) также не имела высокую воспроизводимость (CVC=5/10) при тестируемой сбалансированной точности 0,66, чувствительности 0,63 и специфичности 0,67.

(G>A) и rs1799768 PAI-1 (5G>4G) показали высокую воспроизводимость CVC=6/10 и 2=45, (р< 0,0001).

На рисунке 3.3 представлена дендрограмма, описывающая характер и силу межгенных взаимодействия при ишемическом инсульте. Выявленная программой MDR модель состоит из двух связанных между собой кластеров. Первый кластер включает модуль с дублирующим типом взаимодействия локусов rs1799768 PAI-1 (5G>4G) и rs4646994 ACE (Ins>Del), который, в свою очередь, сильно связан с локусом rs2910829 PDE4D (G>A) (синий цвет линий).

Второй кластер содержит сильно взаимодействующие между собой локусы гена ALOX5AP – rs9551963 (A>C) и rs10507391 (T>A) (красный цвет линий). В свою очередь, первый и второй кластеры также демонстрируют эффект дублирующего типа взаимодействия (зеленый цвет линий).

Глава 4. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МОЛЕКУЛЯРНЫХ И

КЛИНИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ С УЧЕТОМ ПОЛА, ВОЗРАСТА И КУРЕНИЯ

4.1 Анализ клинических показателей С целью определения силы ассоциации выбранных генетических маркеров с общими факторами риска ИИ – гиперлипидемией, гипертонией, курением и полом у 154 человек – здоровых (30 мужчин и 33 женщины) и 91 больных (44 мужчины и 47 женщин) в сыворотке крови был проведен биохимический анализ основных параметров липидного метаболизма [3, 14, 18, 19]. У каждого участника исследования были измерены систолическое и диастолическое артериальное давление, вес и выявлен статус курения.

С учетом возраста группа больных была разделена на молодую ( лет) возрастные группы. Как и следовало ожидать, в результате однофакторного дисперсионного анализа были выявлены значимые различия уровня показателей артериального давления, метаболизма липидов и глюкозы между исследуемыми группами здоровых и больных ИИ. При помощи метода логической регрессии был оценен вклад каждого из клинических показателей и выявлено, что такие факторы как курение, излишний вес, повышение систолического артериального давления и уровня триглицеридов вносят вклад в развитие ишемического инсульта с 2 = 169,9 и р < 0,0001 (см. табл. 4.1).

Таблица 4.1 Оценка эффективности клинических показателей курения. Лучшей из межгенных взаимодействий у курящих при ишемическом инсульте выделим 2-х локусную модель, в состав которой входили rs9551963 ALOX5AP (A>C) и rs2910829 PDE4D (G>A) с воспроизводимостью в 60% и 2=20,6 (рA) rs4646994 ACE (Ins>Del), rs1799768 PAI-1(5G>4G) на ишемический инсульт.

Выявлено, что вклад курения в ишемический инсульт составляет 1,79%. У курящих больных ИИ локусы rs2910829 PDE4D и rs9551963 гена ALOX5AP синергетически взаимодействовали между собой (красный цвет линий на рис. 4.5). Тогда как, в дендрограмме больных инсультом без учета факта курения между данными локусами наблюдается тип дублирующего взаимодействия (зеленый цвет линий на рис. 3.3).

взаимоотношений исследуемых генов, участвующих в процессах фибринолиза (PAI-1), воспаления (ALOX5AP), сосудистой функциональности (PAI-1, АСЕ) и атерогенеза (PAI-1, PDE4D).

Таким образом, комплексная оценка влияния генетических факторов и курения на риск возникновения ишемической болезни позволила не только установить ключевые ген-средовые взаимодействия, формирующие основу предрасположенности к болезни, но и обозначить механизмы, посредством которых факторы внешней среды способны спровоцировать патологические изменения.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Выявлено, что распределение частот аллелей генов F2, F5, GP1BA, PAI-1, ALOX5AP, PDE4D в популяции Республики Молдовы соответствовало ожидаемым закону равновесия Харди-Вайнберга (р>0,05). Для I/D полиморфизма гена АСЕ в контрольной выборке наблюдалось отклонение от данного закона (p=0,04).

2. В группе контроля установлен высокий уровень гетерозиготности для полиморфных вариантов генов AСЕ (0,605), PAI-1 (0,512), rs10507391 и rs9551963 ALOX5AP (0,433 и 0,409) и rs2910829 PDE4D (0,443). Выявлено отсутствие носителей мутантной аллели гена F2, а частота мутантной аллели гена F5 соответствовала 4,5%, минорных аллелей генов GP1BA и rs152312 PDE4D, соответственно 14,0% и 7,3%.

3. Создана 4-локусная модель из следующей комбинации полиморфных локусов rs ACE (Ins>Del), rs9551963 ALOX5AP (A>C), rs2910829 PDE4D (G>A), rs1799768 PAIG>4G) с достаточной воспроизводимостью (60%) и высокими показателями специфичности и чувствительности, соответственно 0,75 и 0,69 (рC) i rs2910829 PDE4D (G>A).

Problema tiinific important soluionat. S-a apreciat contribuia variantelor polimorfe ale genelor F2, F5, GP1BA, PAI-1, АСЕ, ALOX5AP, PDE4D i a unor factori modificaionali de risc (fumatul, indicatorii metabolismului lipidelor i glucozei) n predispoziia pentru ictusul ischemic n dependen de vrst i sex.

Semnificaia teoretic. Datele prezentate aprofundeaz cunotinele despre distribuia frecvenelor variantelor polimorfe ale genelor F2, F5, GP1BA, PAI-1, АСЕ, ALOX5AP i PDE4D n populaia Republicii Moldova.

Valoarea aplicativ a lucrrii. Analiza molecular-genetic prezint o contribuie semnificativ la nelegerea structurii predispoziiei ereditare pentru ictusul ischemic. Rezultatele studierii variantelor polimorfe ale genelor candidate pentru ictusul ischemic, particularitilor de asociere a markerilor genetici cu ictusul n dependen de sex pot fi utilizate pentru consultarea medico-genetic. Cu scopul depistrii persoanelor cu risc nalt de dezvoltare a afeciunii cerebrovasculare ct i efectuarea profilaxiei prenozologice, se recomand identificarea purttorilor alelelor D al genei ACE la brbai i A a locusului rs10507391 al genei ALOX5AP la femei.

Implementarea rezultatelor tiinifice. Rezultatele obinute despre distribuia variantelor polimorfe de gene studiate sunt implementate n procesul de cercetare a riscului cardiovascular n populaia tnr a Republicii Molodva i poate fi utilizat att pentru cursurile de genetic medical, biochimie, fiziopatologie, medicin intern n universitile cu profil medical i biologic, ct i pentru cursurile de perfecionare a lucrtorilor medicali.

АННОТАЦИЯ

Мокан Елена, «Эффективность молекулярных маркеров в определении генетического риска ишемического инсульта». Диссертация на соискание степени доктора биологии, Кишинев, 2012.

Диссертация содержит: введение, 4 главы, общие выводы и рекомендации, библиографию из 178 источников, 8 приложений, 114 страниц основного текста, 19 рисунков, 23 таблиц.

Полученные результаты опубликованы в 21 научной работе.

Ключевые слова: ишемический инсульт, генетическая предрасположенность, молекулярный маркер, полиморфизм ДНК, межгенные и ген-средовые взаимодействия.

Область исследований: 03.00.15 – Генетика Цель работы: оценка эффективности полиморфных вариантов генов-кандидатов в качестве маркеров ишемического инсульта в популяции Республики Молдовы.

Задачи: проанализировать распространенность полиморфных вариантов генов-кандидатов F2, F5, GP1BA, PAI-1, ACE, ALOX5AP и PDE4D в исследуемых выборках; определить ассоциации полиморфных вариантов генов, кодирующих компоненты системы свертывания, фибринолиза, эндотелиальной функции и воспаления, с ишемическим инсультом; исследовать взаимосвязь полиморфных вариантов генов-кандидатов со значениями артериального давления, показателями метаболизма липидов и глюкозы в зависимости от возраста и пола; на основе изучения моделей взаимодействия генов оценить значимость ключевых генов п предрасположенности к ишемическому инсульту; описать характер влияния курения – поведенческого фактора риска развития ишемического инсульта, на взаимодействие между генами-кандидатами.

Научная новизна и оригинальность. Впервые проведен комплексный анализ наследственной предрасположенности к ишемическому инсульту в популяции Республики Молдова. Доказано, что гаплотип АС, в состав которого входят аллели А локуса rs10507391 и аллель С локуса rs9551963 гена ALOX5AP, ассоциирован с повышением уровня триглицеридов и понижением концентрации липопротеинов высокой плотности с возрастом и определяет повышение риска развития ишемического инсульта. На основе результатов выявлена гендерная гетерогенность полученных ассоциаций, описаны межгенные взаимодействия исследуемых локусов генов-кандидатов и охарактеризовано воздействие курения на тип и силу межгенных взаимодействий между локусами rs9551963 ALOX5AP (A>C) и rs2910829 PDE4D (G>A).

Решенная научная проблема. Описано влияние полиморфных вариантов генов F2, F5, GP1BA, PAI-1, АСЕ, ALOX5AP, PDE4D и некоторых модифицирующих факторов риска (курение, показатели метаболизма липидов) в предрасположенность к ишемическому инсульту в зависимости от возраста и пола в популяции РМ.

Теоретическая значимость. Представленные данные расширяют знание о распределении частот полиморфных вариантов генов F2, F5, GP1BA, PAI-1, АСЕ, ALOX5AP и PDE4D в популяции РМ.

Практическая значимость. Полученные данные молекулярно-генетического анализа вносят вклад в понимание структуры наследственной предрасположенности к ишемическому инсульту. Результаты исследования особенностей ассоциации генетических маркеров с инсультом в зависимости от пола могут быть использованы для медико-генетического консультирования. Рекомендуется выявлять носительство аллелей D гена ACE для мужчин и A локуса rs10507391 гена ALOX5AP для женщин с целью раннего выявления лиц с высоким риском развития сосудистых заболеваний мозга и проведения донозологической профилактики.

Внедрение научных результатов. Результаты распределения частот полиморфных вариантов исследуемых генов используются при определении сердечно-сосудистого риска в молодой популяции РМ, а также могут быть использованы в ходе преподавания медицинской и клинической генетики, биохимии, патофизиологии, внутренних болезней в вузах медицинского и биологического профиля, а также в рамках курсов повышения квалификации медицинских работников.

ANNOTATION

Elena Mocan, “The efficiency of molecular markers to identify genetic risk for ischemic stroke”, PhD thesis. This thesis is submitted to obtain a doctoral degree in biology, Chisinau, 2012.

Thesis structure: The thesis is written in Russian and consists of an introduction, 4 chapters, general conclusions and recommendations, bibliography of 178 titles and 8 annexes. The main text of the thesis comprises 114 pages, 19 figures and 23 tables. The basic results of the thesis were published in 21 scientific papers.

Key words: ischemic stroke, genetic predisposition, molecular marker, DNA polymorphism, gene interaction, gene-environmental interaction.

Field of research: 03.00.15 – Genetics.

The aim of study: to evaluate the efficiency of gene candidate polymorphisms as markers of ischemic stroke in the population of the Republic of Moldova.

Tasks: to analyze the prevalence of polymorphisms of F2, F5, GP1BA, PAI-1, ACE, ALOX5AP and PDE4D candidate genes in studied groups; to determine associations of polymorphic variants of genes that encode components of coagulation, fibrinolysis, endothelial function and inflammation with ischemic stroke; to examine the relationship of candidate genes polymorphisms with values of blood pressure, lipid metabolism and glucose depending on age and gender; based on the patterns of genes to appreciate significance of key-genes of genetic susceptibility to the ischemic stroke; to describe the influence of smoking – behavioral risk factor of ischemic stroke, in the interaction between candidate genes.

Scientific novelty and originality: For the first time the comprehensive analysis of the genetic susceptibility to ischemic stroke in the population of the Republic of Moldova was held. It’s proved that AC haplotype, which includes alleles A rs10507391 locus and C allele rs9551963 locus of ALOX5AP gene is associated with increased levels of triglycerides and a decreased concentration of high density lipoprotein cholesterol with age and determine the increased risk for ischemic stroke.

Based on the results was identified the gender heterogeneity of obtained associations, described gene interactions of studied polymorphic loci of candidate genes and characterized the impact of smoking on the type and power of intergenic interactions between loci rs9551963 ALOX5AP (A>C) and rs PDE4D (G>A).

The important scientific solved problem. It was detected the contribution of studied polymorphic gene variants F2, F5, GP1BA, PAI-1, ACE, ALOX5AP and PDE4D and some modifying risk factors (smoking, indices of lipid metabolism) in the susceptibility to ischemic stroke in the population of the Republic of Moldova.

The theoretical significance. Presented results extend the knowledge of the genetic diversity and distribution of studied gene polymorphisms F2, F5, GP1BA, PAI-1, ACE, ALOX5AP and PDE4D in the population of the Republic of Moldova.

Applicative value of the thesis. The results of molecular-genetic analysis show a significant contribution to understanding the structure of hereditary predisposition to ischemic stroke. The particularities of association of genetic markers with stroke based on gender can be used for the medico-genetic consultation. It’s recommended to identify the carriers of D allele of ACE gene for men and A allele of locus rs10507391 of ALOX5AP gene for women for early detection of individuals with high risk of cerebrovascular diseases and prenosological prevention.

The implementation of the scientific results. Results about the frequency distribution of the studied polymorphic variants of genes are used in the determination of cardiovascular risk in young population of Republic of Moldova, also its can be used in practical medicine and prevention of cerebrovascular disorders, the teaching of medical and clinical genetics, biochemistry, pathophysiology, internal medicine in the universities of medical and biological profile, as well as in courses of continuing medical education.

МОКАН ЕЛЕНА

ЭФФЕКТИВНОСТЬ МОЛЕКУЛЯРНЫХ МАРКЕРОВ

В ОПРЕДЕЛЕНИИ ГЕНЕТИЧЕСКОГО РИСКА

ИШЕМИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА

Автореферат диссертации на соискание ученой степени Подп. в печ.:14-08-2012 Формат A Бум. cтандарт Печ. лазер Тираж 20 экз.

Усл. печ. л.: 1,0 Заказ № Кишинв, MD-2028, Республика Молдова

ACADEMIA DE TIINE A MOLDOVEI

INSTITUTUL DE GENETIC I FIZIOLOGIE A PLANTELOR

MOCAN ELENA

EFICIENA MARKERILOR MOLECULARI

N DETERMINAREA RISCULUI GENETIC

PENTRU ICTUSUL ISCHEMIC

Autoreferatul tezei de doctor n biologie

Похожие работы:

«Самойлова Анна Васильевна ОСОБЕННОСТИ ГЕОЛОГИЧЕСКОГО РАЗВИТИЯ, СТРОЕНИЯ И ПРОДУКТИВНОСТИ ПОЗДНЕДЕВОНСКИХ ОТЛОЖЕНИЙ РОВЕНСКОКРАСНОКУТСКОГО ВАЛА (на примере месторождения Белокаменное). СПЕЦИАЛЬНОСТЬ: 25.00.12. - Геология, поиски и разведка горючих ископаемых АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата геолого-минералогических наук Москва – 2006 Работа выполнена в Институте проблем нефти и газа РАН Научный руководитель : доктор геолого-минералогических наук,...»

«СИЛАЙЧЕВ Павел Александрович ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ КРИТЕРИИ ОТРАСЛЕВОЙ ПОДГОТОВКИ В ПРОФЕССИОНАЛЬНО -ПЕДАГОГИЧЕСКОМ ОБРАЗОВАНИИ 13.00.08 – теория и методика профессионального образования Автореферат диссертации на соискание у ченой степени доктора педагогических наук Москва 2006 Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учре ждении высшего профессионального образования Московский государственный а гроинженерный университет имени В.П. Горячкина Научный...»

«Секиринский Денис Сергеевич...»

«Дорохова Евгения Владимировна ОРГАНИЗАЦИОННО-ТЕХНИЧЕСКОЕ СТРУКТУРИРОВАНИЕ СИСТЕМЫ УЧЕТА В ПРОЦЕССЕ АВТОМАТИЗАЦИИ Специальность 08.00.12 – Бухгалтерский учет, статистика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата экономических наук Москва – 2007 Диссертация выполнена на кафедре учета, анализа и аудита экономического факультета Московского Государственного Университета им. М.В....»

«Даниленко Ольга Константиновна ПОВЫШЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕСОПОЛЬЗОВАНИЯ ПРИ ПОДГОТОВКЕ ЛОЖ ВОДОХРАНИЛИЩ (НА ПРИМЕРЕ БОГУЧАНСКОЙ ГЭС) 05.21.01 – Технология и машины лесозаготовок и лесного хозяйства АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Братск – 2008 2 Работа выполнена в Братском государственном университете. доктор технических наук, профессор Научный руководитель : Угрюмов Борис Иванович доктор технических наук, профессор Официальные...»

«Пузь Артем Викторович МНОГОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ПОКРЫТИЯ ДЛЯ СПЛАВОВ МЕДИЦИНСКОГО НАЗНАЧЕНИЯ 02.00.04 – физическая химия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Владивосток – 2014 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институте химии Дальневосточного отделения Российской академии наук (ИХ ДВО РАН) Научный руководитель : доктор химических наук, профессор Гнеденков Сергей Васильевич Официальные оппоненты :...»

«ДОЛГУШИН Александр Борисович СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ ПРОГРАММНО-ЦЕЛЕВОГО УПРАВЛЕНИЯ ПРИРОДОПОЛЬЗОВАНИЕМ (НА ПРИМЕРЕ ПРИОРИТЕТНОГО НАЦИОНАЛЬНОГО ПРОЕКТА) Специальность 08.00.05 – Экономика и управление народным хозяйством (экономика природопользования) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата экономических наук Москва 2012 2 Работа выполнена на кафедре управления природопользованием и охраны окружающей среды Федерального государственного бюджетного...»

«Вовченко Богдан Витальевич Церковь и государство в учении современной Русской православной церкви Специальность 23.00.01 – Теория политики, история и методология политической наук и Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата политических наук Москва 2010 Работа выполнена на кафедре истории социально-политических учений факультета политологии МГУ им. М.В. Ломоносова. Научный руководитель : кандидат политических наук, доцент Ермашов Дмитрий Васильевич...»

«РАЗИНКОВ ДМИТРИЙ ГЕННАДИЕВИЧ ТЕОРЕТИКО-ПРАВОВЫЕ ОСНОВЫ ЗАЩИТЫ ЛИЧНЫХ НЕИМУЩЕСТВЕННЫХ ПРАВ РОССИЙСКИХ ГРАЖДАН Специальность 12.00.01 – теория и история права и государства; история учений о праве и государстве АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата юридических наук Санкт-Петербург 2 Работа выполнена на кафедре теории и истории государства и права НОУ ВПО Юридический институт (Санкт-Петербург) Научный руководитель :...»

«Черноусов Антон Владимирович Модели, методы и базовые программные компоненты для создания вычислительной инфраструктуры исследований в энергетике Специальность 05.13.18 – Математическое моделирование, численные методы и комплексы программ Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук Иркутск 2008 2 Работа выполнена в Институте систем энергетики им. Л.А. Мелентьева Сибирского отделения Российской академии наук (ИСЭМ СО РАН). Научный...»

«ВАТУТИН АЛЕКСЕЙ НИКОЛАЕВИЧ ПОЛИТИКО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ФОРМИРОВАНИЯ ОБЩЕСТВЕННОГО МНЕНИЯ В УСЛОВИЯХ ВОЕННО-ПОЛИТИЧЕСКОГО КРИЗИСА Специальность 23.00.02 - Политические институты, процессы и технологии (политические наук и) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата политических наук Пятигорск – 2013 Работа выполнена на кафедре государственной политики и государственного управления ФГБОУ ВПО Кубанский государственный университет Научный руководитель :...»

«Чащин Владимир Владимирович ФОРМИРОВАНИЕ СИСТЕМЫ МАРКЕТИНГА ПЕРСОНАЛА НА РЫНКЕ ТРУДА Специальность 08.00.05 – экономика и управление народным хозяйством: маркетинг АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора экономических наук Ростов-на-Дону – 2013 Работа выполнена на кафедре Маркетинг и реклама в ФГБОУ Волгоградском государственном университете. Научный консультант : Попкова Елена Геннадьевна доктор экономических наук, профессор ФГБОУ ВПО Волгоградский...»

«Исакова Анастасия Андреевна СОСТАВ, СТРУКТУРА И ФУНКЦИИ ЛЕКСИКО-СЕМАНТИЧЕСКОЙ ГРУППЫ ДЕНДРОНИМЫ В ХУДОЖЕСТВЕННОМ ТЕКСТЕ НАЧАЛА XX ВЕКА (на материале поэзии Серебряного века) 10.02.01 – русский язык АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата филологических наук Курск 2011 1 Работа выполнена на кафедре теории и истории русского языка Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Брянский государственный университет имени...»

«УДК 800.863-053.2 801.24 ДОБРОВА Галина Радмировна ОНТОГЕНЕЗ ПЕРСОНАЛЬНОГО ДЕЙКСИСА (ЛИЧНЫЕ МЕСТОИМЕНИЯ И ТЕРМИНЫ РОДСТВА) Специальность 10.02.19 – теория языка Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора филологических наук Санкт-Петербург 2005 Работа выполнена на кафедре детской речи Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Российский государственный педагогический университет им. А. И. Герцена Официальные оппоненты...»

«ЩАПОВА Елена Владимировна ВСЕРОССИЙСКОЕ ХОРОВОЕ ОБЩЕСТВО В ИСТОРИИ ОТЕЧЕСТВЕННОЙ МУЗЫКАЛЬНОЙ КУЛЬТУРЫ XX СТОЛЕТИЯ ВТОРОЙ ПОЛОВИНЫ Специальность 17.00.02 – Музыкальное искусство АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата искусствоведения Ростов-на-Дону – 2013 2 Работа выполнена на кафедре хорового дирижирования Академии хорового искусства имени В.С. Попова Научный руководитель : доктор искусствоведения, профессор Ефимова Наталья Ильинична Официальные...»

«ВЕТРОВА АННА АНДРИЯНОВНА БИОДЕГРАДАЦИЯ УГЛЕВОДОРОДОВ НЕФТИ ПЛАЗМИДОСОДЕРЖАЩИМИ МИКРООРГАНИЗМАМИДЕСТРУКТОРАМИ 03.01.06 - Биотехнология (в том числе бионанотехнологии) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва - 2010 Работа выполнена в Пущинском государственном университете на базе лаборатории биологии плазмид Учреждения Российской академии наук...»

«Досова Анна Владимировна ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ И ПРАКТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ КОМПЛЕКСНОГО КРИМИНАЛИСТИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ДОКУМЕНТОВ С ИЗМЕНЕННЫМИ РЕКВИЗИТАМИ Специальность: 12.00.12 – криминалистика; судебно-экспертная деятельность; оперативно – розыскная деятельность Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата юридических наук Волгоград – 2014 Работа выполнена в федеральном государственном казенном образовательном учреждении высшего профессионального образования...»

«Федосеева Евгения Николаевна ПЛАЗМОХИМИЧЕСКИЕ ПРЕВРАЩЕНИЯ И ОСОБЕННОСТИ ПОЛИМЕРИЗАЦИИ АНИЛИНА Специальность 02.00.04 – Физическая химия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук Москва 2010 www.sp-department.ru 2 Работа выполнена в Федеральном государственном унитарном предприятии Ордена Трудового Красного Знамени Научно-исследовательский физико-химический институт им. Л.Я. Карпова Научный руководитель : Драчев Александр Иванович кандидат...»

«ДМИТРИЕВА ОЛЬГА АЛЕКСАНДРОВНА МЕТОДИКА РАЗВИТИЯ ПРОФЕССИОНАЛЬНОПЕДАГОГИЧЕСКОЙ КОМПЕТЕНТНОСТИ В ОБЛАСТИ ПРОЕКТИРОВАНИЯ УЧЕБНЫХ МАТЕРИАЛОВ ПО ИНФОРМАТИКЕ У УЧИТЕЛЯ НАЧАЛЬНЫХ КЛАССОВ 13.00.02 – теория и методика обучения и воспитания (информатика) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Челябинск – 2009 Работа выполнена на кафедре информатики и методики преподавания информатики Государственного образовательного учреждения высшего...»

«Быкова Татьяна Васильевна ЖАНРОВО-СТИЛИСТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И СТРУКТУРА ДЕЛОВЫХ ДОКУМЕНТОВ УЧРЕЖДЕНИЙ ПРОСВЕЩЕНИЯ г.ТОБОЛЬСКА ВТОРОЙ ПОЛОВИНЫ XVIII в. Специальность 10.02.01 – Русский язык АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата филологических наук Челябинск – 2012 Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Тобольская государственная социально-педагогическая академия им.Д.И....»








 
2014 www.av.disus.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.