WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 7 |

«VII Съезд Общества физиологов растений России Физиология растений – фундаментальная основа экологии и инновационных биотехнологий и Международная научная школа Инновации в биологии для развития биоиндустрии ...»

-- [ Страница 3 ] --

Такимобразом,результаты,полученныенезависимовусловияхвегетационных опытов и на полевых стационарах, свидетельствуют о влиянии радиации на взаимодействия в системе патоген-растение и необходимости проведения мониторинганадмикроэволюционнымипроцессамиурастенийиихпатогеновв зонахтехногенныхаварий.

бЛОКИРОВАНИЕ МИТОХОНДРИАЛЬНОГО ТРАНСПОРТА ЭЛЕКТРОНОВ

ИНДуЦИРуЕТ АуТОФАГИЮ В РАСТИТЕЛЬНЫХ КЛЕТКАХ

Inhibition of mitochondrial electron transport induces autophagy in plant cells Дмитриева С.А., Пономарева А.А., Минибаева Ф.В., Рябовол В.В.

КазанскийинститутбиохимииибиофизикиКазНЦРАН,г.Казань Тел:(843)231-90-43,Факс:(843)292-73-47;E-mail:s_dmitrieva@list.ru Митохондрии являются основной органеллой, участвующей в генерации активных форм кислорода (АФК) и регулирующей редокс-статус клетки.

Повреждение митохондрий кислородными радикалами может приводить к их исключению из метаболизма клетки, в том числе путем митофагии – процесса элиминациимитохондрий.Намипоказано,чтовусловияхокислительногостресса вклеткахкорнейпшеницыпроисходитаутофагиясобразованиемаутолитических вакуолей (аутофагосом), содержащих фрагменты цитоплазмы и органеллы, в том числе митохондрии. При этом происходило изменение функционирования митохондрий,снижениемитохондриальногомембранногопотенциала,изменение формы (кольцевая форма) и структуры этих органелл (просветление матрикса, уменьшение количества крист). Увеличение содержания АФК при действии прооксидантов может быть обусловлено их эффектами как непосредственно на митохондрии, так и на другие клеточные органеллы и метаболиты. Для подтверждениятого,чтоактивацияаутофагии,втомчислемитофагия,обусловлена сверх-генерацией АФК в митохондриях, нами были проведены эксперименты с использованиемингибиторовэлектрон-транспортнойцепимитохондрий(ротенон, малонат,антимицинА,цианидкалия,салицилгидроксамоваякислота)вразличных комбинациях.

Вотличиеотдействияпрооксидантов,митохондриальныеядынеприводили кснижениюжизнеспособности,однакоусиливалипрооксидант-индуцированную гибельклеток,атакжеувеличивалипродукциювнихАФК.Особеннояркоэффекты митохондриальныхядовпроявлялисьприодновременномподавленииосновного и альтернативного транспорта электронов. На фоне снижения электронного транспортавмитохондрияхнаблюдалинакоплениеАФКиактивациюаутофагии,а такжеизменениеуровняэкспрессииаутофагическихгенов(atg4,atg6).Активация аутофагических генов приводит к формированию аутофагосом и элиминации поврежденныхмолекулиструктур.Способностьмитохондриальныхядовусиливать генерациюАФКиактивироватьпроцессыаутофагиисвидетельствуетотом,что дыхательнаяцепьмитохондрийвноситсущественныйвкладвобразованиеАФК и,вследствиеэтого,играетважнуюрольвзапускеаутофагиивклеткахрастений.

ВЛИЯНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА ЛЕГГЕМОГЛОбИНА А СОИ НА СОДЕРЖАНИЕ

ПИГМЕНТОВ ФОТОСИНТЕТИЧЕСКОГО АППАРАТА у ТРАНСГЕННЫХ РАСТЕНИй

Influence of leghemoglobin gene expression on chlorophyll content in Дмитрюкова М.Ю., баймиев А.Х., Рахманкулова З.Ф., Федяев В.В.

Башкирскийгосударственныйуниверситет,г.Уфа Тел:89272386645;E-mail:maradim@mail.ru Леггемоглобины (легоглобины, Lb) – миоглобин-подобные белки, с молекулярнымвесомоколо16кДа,обладающиевысокимсродствомккислороду. Онинакапливаютсявклубенькахбобовыхрастенийвоченьвысокихконцентрациях.

Леггемоглобиныиграютважнуюрольвпроцессефиксацииазота,поддерживая концентрацию кислорода на низком, но постоянном уровне, достаточном для дыханиябактероидов,нонеингибирующемнитрогеназу.

Для изучения влияния леггемоглобина А сои на содержание пигментов фотосинтетическогоаппаратанамибылисозданытрансгенныерастениятабака (Nicotiana tabacum)сортаSamsun.ГенлеггемоглобинасоиАбылвставленвТ-ДНК вектора для трансформации растений pCambia 1301 под 35S промотор вируса мозаики цветной капусты по сайту рестрикции SmaI. Полученная конструкция была введена электропорацией в клетки Agrobacterium tumifaciens штамм AGLO, устойчивые к хлорамфениколу. Трансформирование растений табака проводилось методом листовых дисков. Экспрессия гена леггемоглобина А сои была подтверждена полимеразной цепной реакцией с использованием кДНК, построенной по мРНК, выделенной из трансгенных растений. В качестве контрольных растений использовались нетрансгенные растения табака сорта Samsun.

Определение хлорофилла проводили спектрофотометрически в вытяжке водногоацетона.Содержаниехлорофиллаавтрансгенныхрастениябылонижена 30%,чемутрансгенных.Такоеснижениесодержанияпигментаможнообъяснить оттягиваниемгема,необходимогодляобразованияхлорофиллавсинтезированные молекулылеггемоглобина.Убобовыхгемоваясоставляющаялегоглобинаобычно синтезируется бактерией, но органоиды растений также могут участвовать в образовании гема в случае неинфицированных клубеньков или когда бактерия неспособнаксинтезу.

Содержание каротиноидов и хлорофилла b у трансгенных и нетрансгенных растенийстатистическинеразличалось.

ИЗуЧЕНИЕ РЕГЕНЕРАЦИОННОй СПОСОбНОСТИ ГИПОКОТИЛЕй РАПСА В

Study of regenerating ability of Brassica napus gypocotyles in condition of in РеспубликанскоеУнитарноеПредприятие«Научно-практическийцентр НациональнойАкадемиинаукпоземледелию»,г.Жодино Тел:+37529-389-75-80,Факс:801775-370-66;E-mail:sergedobrowolski@gmail.com Исследования были направлены на изучение процессов регенерации и повышение эффективности методов культуры in vitro органов и тканей рапса, достижениястабильноговыходаполноценныхрегенерантов.



Использовались два сорта рапса – Милена и Магнат. Донорные растения различного онтогенетического возраста были получены на безгормональной средеMS,укрепленной6г/лагара.Сегментыгипокотилейбылипронумерованы от семядолей к корням как I (ближе к верхушке часть растения – апикальная), II (средняя часть – медиальная) и III (прикорневая часть – базальная). Посадка сегментовгипокотилейбылапроведенанасредуMS,дополненнуювитаминами по B5, гормонами 4 мг/л БА, 2 мг/л КИН, 0,1 мг/л НУК, 3% сахарозы, 500 мг/л Поливинилпирролидон(ПВП),5мг/лактивированногоугляи5мг/лазотно-кислого серебраиукрепленная6г/лагара.

Врезультатебылоустановлено,чтонаибольшейспособностьюкобразованию полноценныхрегенерантовобладаютапикальныесегментыгипокотилей.Наиболее компетентнымиповозрастудонорнымирастениямиявляются15дневные,апо отношениюксвету–выращенныеприосвещении.Уэтиолированныхрастений произошлоотставаниеразвитияотростаиэксплантынеготовыкморфогенезу.

В отношении к куллусогенной способности наиболее перспективны вторые сегментыпятидневныхэксплантов,выращенныхнасвету.Корниболееинтенсивно образуютсяна5дневныхнеосвещенныхэксплантах.

Особенность данной среды заключается в том, что на выходе образуются т.н.полноценныерегенеранты,которыеимеютвдостаточнойстепениразвитые корниилистья(внекоторыхслучаяхстебли),чтовесьмаудобно,т.к.нетребует дополнительныхпересадок.Полноценнымирегенерантыназываютсявтомслучае, когда с развившимися листьями и корнями они могут нормально произрастать внекультурыin vitroидаватьпотомство.Развитиелистьевикорнейпроисходит полярно–наодномполюселистовыеструктуры,анапротивоположном–корни.

Полученные данные указывают на возможность получения полных регенерантоврапсавкультуреinvitroбездополнительныхпассажейипересадок за счёт правильно подобранных концентраций фитогормонов и биологически активных веществ, позволяющих реализовать принципы тотипотентности и полярности вегетативных органов растения. Использование данных веществ значительно упрощает и удешевляет процесс получения полных регенерантов, позволяетзасравнительнокороткийпромежутоквремениполучитьнеобходимое количестворегенерантов.

РОЛЬ ЦИКЛОЗИСА В ВОЗНИКНОВЕНИИ ФуНКЦИОНАЛЬНОй

ГЕТЕРОГЕННОСТИ СЛОЯ ХЛОРОПЛАСТОВ И ПЛАЗМАЛЕММЫ В КЛЕТКАХ

ВОДОРОСЛИ CHARA CORALLINA

Role of cyclosis in the functional heterogeneity originating at the plasmalemma Московскийгосударственныйуниверситетим.М.В.Ломоносова,г.Москва Тел.:(495)939-35-03.Факс:(495)939-11-15;E-mail:dodonova.sveta@gmail.com Процесс самоорганизации живых систем вызывает большой интерес, но в настоящее время механизмы возникновения и роль таких процессов изучены недостаточно.Известно,чтоклеткиCharaнасветуформируютдомены(кислыеи щелочныезоны),различающиесяпоуровнюpHвпримембранныхслояхсреды и по уровню нефотохимического тушения флуоресценции хлорофилла (NPQ).

Поглощение света хлоропластами служит основным условием возникновения таких доменов. Наряду с этим существуют и другие факторы, роль которых практически ещё не раскрыта. Представляется вероятным, что направленное движениецитоплазмы(циклозис)играетважнуюрольврегуляциииподдержании функциональной гетерогенности растительных клеток. Для выявления роли циклозиса в формировании гетерогенных доменов подходят условия, близкие кестественномунеоднородномуосвещению,когдавклеткечередуютсяучастки с фотосинтетическим и темновым метаболизмом. Поэтому в экспериментах использовали как общее, так и локальное освещение клеток Chara. Рабочей гипотезой служило предположение, что обмен ионов и метаболитов между хлоропластами и цитоплазмой в освещенном участке клетки изменяет состав цитозоля, который, распространяясь с потоком, оказывает влияние на транспортныесистемыплазмалеммыифлуоресцентныепараметрыхлоропластовв пограничныхзатененныхучастках.ВсвязисэтимизмерялиН+-транспортирующую активностьплазмалеммыиNPQвхлоропластахзатенённыхучастковклетокChara наодинаковыхрасстоянияхпоразныестороныотзонылокальногоосвещения.

Показано, что измеряемые показатели при равном удалении по длине клетки отобластиосвещениясущественноразличаютсявзависимостиотнаправления движения цитоплазмы. Когда в зону измерения поступала цитоплазма из освещенного участка, наблюдали формирование щелочной зоны и повышение уровня NPQ в хлоропластах. Если же в зону измерения попадала цитоплазма из затененного участка, формирования щелочной зоны и NPQ не происходило.

Установлено,чтопритокцитоплазмывзонуумеренногоосвещенияиззатененных участковклеткиповышаетквантовуюэффективностьлинейногопотокаэлектронов в хлоропластах, причем наиболее сильное стимулирующее влияние циклозиса проявляется при высоких интенсивностях действующего света. Результаты указываютнаучастиециклозисавраспространениифизиологическиактивного интермедиата,оказывающегосущественноевлияниенамембранныйтранспорт, функциональную активность хлоропластов и образование пространственных структурврастительнойклетке.

ТОЛЕРАНТНОСТЬ К КАДМИЮ РАСТЕНИй ПШЕНИЦЫ С ПОВЫШЕННЫМ

СОДЕРЖАНИЕМ ПРОЛИНА

Cadmium tolerance of wheat with enhanced level of proline Долгих Ю.И., Степанова А.Ю., Осипова Е.А., Мохамед С.Е.М., Терешонок Д.В.

УчреждениеРоссийскойакадемиинаукИнститутфизиологиирастений Тел:(499)231-83-34,Факс:(499)977-80-18;E-mail:ivan-d1@yandex.ru Протекторная роль пролина показана при различных абиотических стрессах: обезвоживании, засолении, действии пониженных температур и др. Менее исследована защитная функция пролина в случае действия тяжелых металлов в токсичных концентрациях. Целью работы было сравнение чувствительности к кадмию растений пшеницы с нормальным и повышенным содержанием эндогенного пролина. Объектами работы были растения яровой мягкой пшеницы (Triticum aestivum L.) сортов Энита, Геммиза-1 и Саха-69. Было использовано два подхода: в первом случае методом клеточной селекции получали толерантные растения и определяли в их тканях уровень пролина, во втором случае анализировали чувствительность к кадмию трансгенных растенийсповышеннойконцентрациейэндогенногопролина.Каллусныеткани инкубировали на селективной среде, содержащей 100 мкМ CdCl2, и отбирали клетки, способные в этих условиях регенерировать растения. Среди потомства полученных регенерантов были отобраны растения, которые по параметрам ростадостовернопревосходилоисходныерастения,непрошедшиеселекциюin vitro.Толерантныеформывстрессовыхусловияхсодержаливлистьяхбольшее количество пролина по сравнению с исходными растениями и регенерантами, не показавшими повышения устойчивости; у некоторых растений эта разница достигала 10 раз. Во второй серии опытов исследовали реакцию на кадмий растений пшеницы, трансформированных геном пролиндегидрогеназы (pdh) в антисмысловой ориентации и содержащих вследствие этого больше пролина.

Влияниехлоридакадмияоценивалипоростуипродуктивностирастенийвпочве, содержащейкадмий.Учитываямалуюдоступностьметаллавпочве,былавыбрана высокаяконцентрация160мг/кгпочвы.Вэтихусловияхкактрансформированные, такиконтрольныерастениямоглирасти,ноихсеменнаяпродуктивностьбыла понижена.Трансгенныерастенияпревосходиликонтрольныепосреднемучислу колосьев на растение, по среднему числу зерен на растение и среднему весу 100зерен.Опытыстрансгеннымирастениямиподтвердилисущественнуюроль пролинавобеспеченииустойчивостиккадмию.Прикультивированиивводной культуреивпочвевприсутствиикадмиярастениясболеевысокимсодержанием пролинанакапливаливнадземнойчастибольшетяжелогометалла,чемисходные.

Полученныерезультатыпоказали,чтоповышениеуровняэндогенногопролина способствовало увеличению устойчивости растений к кадмию и влияло на поглощениеитранспортпорастениюионовметалла.

ПРОТЕИНАЗНО-ИНГИбИТОРНАЯ СИСТЕМА ЛЮПИНА уЗКОЛИСТНОГО

(LUPINUS ANGUSTIFOLIUS L.) В уСЛОВИЯХ ВОЗДЕйСТВИЯ ИОНОВ ХЛОРА

Proteinase-inhibitor system of blue lupine (Lupinus angustifolius L.)under ГНУИнститутэкспериментальнойботаникиим.В.Ф.КупревичаНАНБеларуси, Тел:(+37517)2841660,Факс:(+37517)2841853;E-mail:domash@biobel.bas-net.by Однимизстрессовыхфакторов,воздействующихнапосевысельскохозяйственных растенийявляетсязасоление.Солевойстрессвызываетрядфизиологическихи биохимических реакций, которые протекают в клетках. Имеются сведения, что поддействиемстрессасинтезируютсябелки,индуцирующиеобразованиеионных каналов,белкитепловогошока,защищающиебиополимерыклетки.Средиэтих белковследуетотме-титьсинтезингибиторовпротеазилектинов.

Протеолитические ферменты принимают активное участие в различных проявленияхжизнедеятельностирастений.Регуляцияактивностиэтихферментов реализуется с участием белков-ингибиторов, способных обра-тимо связывать ферменты в неактивный комплекс. В литературе имеются фрагментарные сведенияоролисистемыпротеолизавадаптациирастенийкнеблагоприятным факторам среды. Наши исследования показали, что 0,1 М NaCl вызывает угнетение активности нейтральных, кислых и щелочных протеаз (БАПАазы) как в семядолях, так и зародышах прорастающих семян люпина узколистного.

СнижениеактивностинейтральныхпротеазиБАПАазывзародышахисемядолях впервыесуткипрорастаниясоставляетвсреднем40%.Начинаястретьихсуток прорастаниянаблюдаетсяповышениеактивностищелочныхпротеазвсреднем на50%.Активностьжеингибиторовпротеиназ(трипсина)повышаласьвпервые сутки прорастания как в семядолях, так и зародышах. Изменения в активности компонентов протеиназно-ингибиторной системы происходило и в ли-стьях 20-дневныхрастенийлюпина,выращенноговводнойкультуренараствореКнопа.

Поддействиемионовхлоранаблюдалосьповышениеактивностивсехизучаемых протеаз в листьях и корнях растений соответст-венно на 15 и 45%. Повышение активностиингибиторовтрипсинасоставляла48и55%.Результатывегетационного опыта показали, что в зрелых семенах люпина не отмечено существенных изменений в активности ферментов. Установлено лишь увеличение активности БАПАазыиингибиторовтрипсинавсреднемна22%.Содержаниебелкабылона уровнеконтроля.

Таким образом, реакция растений на стрессовое воздействие ионов хлора отмечена,восновном,нараннихстадияхпрорастаниясемянлюпина.Оновызывают ответнуюреакциюрастенийввиденакопленияотдельныхкомпонентовсистемы, особенноантистрессовыхбелков-ингибиторовпротеиназ.Показателиактивности системыпротеолизамогутбытьиспользованывпрактикесельскогохозяйства.

ИНДуКЦИЯ РЕГЕНЕРАЦИОННЫХ ПРОЦЕССОВ В СЕГМЕНТАХ ПРОРОСТКОВ

НуТА CICER ARIETINUM L.

Regeneration in the isolated fragments of chickpea Cicer arietinum L. seedlings ГНУВсероссийскийнаучно-исследовательскийинститутзернобобовыхи крупяныхкультурРоссельхозакадемии,г.Орел,п/оСтрелецкое;

Тел: (4862)403751;E-mail: galina@vniizbk.ru Дляизученияусловийиндукциирегенерационныхпроцессоввизолированных сегментах проростков нута Cicer arietinum L. in vitro использовали 2 образца коллекцииВИРк-1029(семеначернойокраскиморщинистые,типDesi)ик- (семенатемно-коричневойокраскитипKabuli).Первичнымиэксплантамислужили фрагментыэпикотилейнедельныхстерильныхпроростков.

Определеноптимальныйрежимстерилизациисемяннута,заключающийсяв последовательномприменении70%этанолавтечение1минутыспоследующей промывкойстерильнойводойииспользованиивкачествевторогостерилизующего агентахлоргексидинглюконатанатриявконцентрации0,5%втечение5минут.

Дляопределенияусловийрегенерацииизучали6вариантовиндукционных сред.Содержание6-бензиламинопурина(БАП)всредахварьировалоот5µМ до20µМ,содержаниеиндолил-3-уксуснойкислоты(ИУК)или-нафтилуксусной кислоты(НУК)изменялосьвпределах0,1–1µМ.Сочетание6-бензиламинопурина синдолилуксуснойкислотойспособствовалоформированиюироступочеки побегов, на средах где в качестве ауксина использовалась -нафтилуксусная кислота наряду с образованием деформированных почек наблюдался рост каллуснойткани.

Скоростьприростатканевоймассыin vitro зависелаотсоотношениярегуляторов роставсреде,ихконцентрации,атакжеотгенотипарастений.КомбинацияБАП сИУКобеспечиваласреднийприростнауровне6,2мг/суткидлягенотипак- и 11,4 мг/сутки для образца к-1507. На средах содержащих БАП в сочетании с НУК прирост изолированных тканей составил 10,2 мг/сутки для образца к- и 23,9 мг/сутки для образца к-1507. В целом наиболее эффективным для роста былоиспользованиевкачествеауксина-нафтилуксуснойкислотывсравнении с индолилуксусной кислотой, и наибольший отклик на культивирование in vitro показалгенотипк-1507скоричневымисеменамивсравнениисобразцомк-1029, имеющимчерныесемена.Среднеечислопобеговформирующихсяна1пробирку варьировалоот2до5,5.Дляформированиякаллусныхтканейвизолированных фрагментахэпикотелейнутаоптимальноиспользованиесредыMSc10µМБАПи 1µМНУК,дляформированияпобеговболееэффективнасредас5µМБАПи0, µМНУК.

Вопросы длительного культивирования изолированных тканей нута in vitro и получения корнесобственных регенерантных растений требуют дальнейшего изучения.

ФОРМИРОВАНИЕ ПИГМЕНТНОГО КОМПЛЕКСА ЛИСТЬЕВ ТОМАТА

(Licopersicon) И ПОДСОЛНЕЧНИКА (Helianthus) В ЗАВИСИМОСТИ ОТ

ОбЛуЧЁННОСТИ И ФОРМЫ МИНЕРАЛЬНОГО ИСТОЧНИКА АЗОТА

Effect of light and form mineral nitrogen on pigments complexes in leafs tomato Дорошенко А.А., Ларикова Ю.С., Кондратьев М.Н.

Тел:8(499)976-20-54;E-mail:Yulialarikova@rambler.ru Выращивание растений томата и подсолнечника при различных уровнях облучённости предопределило разный характер ответных реакций, который зависел как от вида растения, так и формы минерального азота в среде корнеобитания.НаличиеионовNH4+отрицательновлиялонаростподсолнечникаи усиливалопроявлениеэтиоляцииурастенийвряду40-20-8Вт/м2.Раcтениятомата отличалисьменьшейчувствительностьюкприсутствиювсредеионовNH4+,при этомэффектионовNH4+иNO3-каждоговотдельностинаростовыехарактеристики был практически одинаковым. Выявлена неспецифическая ответная реакция пигментсинтезирующих систем 30-дневных растений на уровень облучённости впериодпредподготовки.Содержаниехлорофиллова,вкаротиноидовврасчёте на1гсыроймассывлистьяхрастенийобеихкультур,выращенныхвприсутствии N-N03,помереусилениязатенённости(вряду120-60-25Вт/м2ФАР)увеличивалось, тогдакаквприсутствииионовNH4+резкоснижалось.Показано,чтосуществует определённый(«пороговый»)уровеньоблучённости(длятоматов–30Вт/м2,для подсолнечника–40Вт/м2),придвукратномпонижениикоторойрезкоугнетается синтезхлорофиллав,ноувеличиваетсясодержаниехлорофиллааикаротиноидов.

Пятикратное (от «порогового» уровня) понижение облучённости растений приводило к торможению синтеза всех пигментов. В пределах исследованных уровнейоблучённостиналичия«порогового»уровнядлятоматовиподсолнечника, выращенныхтольконанитратномисточникеазота,невыявлено.Контрользаходом поглощения нитратного и аммонийного азота растениями, выращенными при облучённостивдиапазонеот120до8Вт/м2ФАР,показал,чтокакутоматов,такиу подсолнечниказатенениедо30-20Вт/м2снижаетинтенсивностьпоглощенияионов NO3-иувеличиваетпоглощениеNH4+,причёмионыаммониялучшепоглощались в ночные часы, тогда как нитрат – днём. Однако при максимальном затенении (8-12Вт/м2)проявиласьвидоваяспецифичностьвизбирательностипоглощения форм минерального азота 30-дневными растениями: томаты преимущественно поглощалиионыNH4+,втовремякакрастенияподсолнечникапредпочиталиионы NO3-.Изприведённыхданныхследует,чторастениятоматаиподсолнечникаимеют отличающиесямеханизмыадаптациикзатенению:подсолнечникужевмолодом возрасте(9-дневныерастения)способенинтенсивнопоглощатьиассимилировать восстановленнуюформуазота,тогдакакутоматовэтаспособностьформируетсяв онтогенезе.Можнопредположить,чтопреимущественноепоглощениерастениями томата и подсолнечника восстановленной формы азота в ночные часы, а также при низкой облучённости вызвано дефицитом АТФ и восстановительной силы, необходимыхдлявосстановленияионовNO3-доаммиака.

ФИЗИОЛОГО-ГЕНЕТИЧЕСКИй бАЗИС ФОРМИРОВАНИЯ ПРОДуКТИВНОСТИ

ЗЕРНОВЫХ РАСТЕНИй ПРИ ВЗАИМОДЕйСТВИИ ГЕНОТИП – СРЕДА

Physiological and genetic basis of grain crop productivity forming Драгавцев В.А.1, Гончарова Э.А.2, Щедрина З.А. ГосударственноенаучноеучреждениеАгрофизическийинститут ГосударственноенаучноеучреждениеВсероссийскийнаучноисследовательскийинститутрастениеводстваимениН.И.Вавилова Тел:(812)534-13-24,Факс:(812)531-19-00;E-mail:natalia1379@mail.ru В систему регуляции генотип – среда входило моделирование разных экосистем.Исследоваласьизменчивостьважнейшихколичественныхпризнаков, детерминирующихпродуктивность,устойчивостьикачествогенотиповпшеницы и ячменя. Эксперименты проводили в регулируемых системах (фитотрон, вегетационныетеплицы)ивполевыхусловиях.

При экстремальном гидрорежиме (засуха) не только меняется (возрастает) экспрессия генетической системы аттрактивности, но и резко изменяется и соотношениеисточниковаттракциипластическихвеществзерном,повышается соотношение массы колос/стебель в разной степени у генотипов различного экологического происхождения; система микрораспределения пластики (масса зерно/колос)проявляетустойчивостькэтомуфактору.Устойчивостьгенотипак засухезависитотуровнейтерморежимавегетации.

При этом обнаружено, что активизация систем ростовой и аттрактивной деятельностирастенийимеютразличныеуровнитемпературныхоптимумов.

Степеньотзывчивостигенотипанафакторминеральногопитанияприразных сочетаниях гидротермических факторов специфична: при оптимальных дозах удобрениястимулируют,априизбыточных–подавляютактивностьаттрактивной системы.Кфункционированиюсистемымикрораспределенияпластики,уровень минерального питания оказался менее эффективным, а при его повышении, расчетныепоказателиаттрактивностиимикрораспределенияпластикивколосе выявляютзаметноеусилениепоступленияпластическихвеществвформирующиеся зерновки.

Моделирование и регуляция комплекса средовых факторов позволяют экспериментально установить принципиальное значение стабильности температурно-светового режима в период вегетации растений, которая резко меняет(приразномуровнетемператур)отзывчивостьнаудобрения,депрессию от засухи, зоны чувствительности к температуре и их различия у разных генотипов,длительностьфазвторойполовиныонтогенеза,атакжевеличинуих продуктивности.

ВЛИЯНИЕ ЗАКАЛИВАЮЩИХ К ХОЛОДу ТЕМПЕРАТуР НА ДЫХАНИЕ АКТИВНО

ВЕГЕТИРуЮЩИХ РАСТЕНИй

Effect of low-hardening temperatures on respiration of actively vegetating plants УчреждениеРоссийскойакадемиинаукИнститутбиологии КарельскогонаучногоцентраРАН,г.Петрозаводск Тел:(8142)76-27-12,Факс:(8142)76-98-10;E-mail:holoptseva@krc.karelia.ru Литературные данные о влиянии температуры на интенсивность дыхания растений довольно многочисленны и противоречивы, что, в ряде случаев, объясняетсянедооценкойеезональноговлияниянарастения,таккакграницызон специфичныдлягенотипаизависятотфазыразвитияиусловийвнешнейсреды.

Изучениезональноговлияниятемпературынадыханиерастенийврегулируемых условияхсредыпоказало,чтоеефлуктуациявфоновойзоненоситпериодический характеринеимеетпоследействия,привысокойсоставляющейроста.Величина дыхательногокоэффициентаблизкакединице.Припереходетемпературывзону холодового закаливания, возрастает сила ее влияния на дыхание, появляется последействие как при возврате температуры в фоновую зону, так и при ее флуктуации внутри зоны, зависящее от интенсивности и продолжительности закаливания.Померезакаливаниявозрастаетинтенсивностьдыхания,вплотьдо уровняфоновойзонызасчетповышениясоставляющейдыханияподдержания,при снижениисоставляющейдыханияроста.Происходитперестройкавструктурнофункциональной организации генома, усиливаются процессы, направленные на повышение устойчивости тканей; увеличивается количество защитных веществименяетсялипидныйсоставвнутриклеточныхмембранвнаправлении стабилизацииработыферментов,связанныхссинтезомираспадомАТФ,улучшается энергетический баланс клетки; кислотноcть тканей смещается в нейтральную сторону, изменяется положение изоэлектрической зоны водорастворимых белковпоотношениюквнутриклеточнойкислотности,возрастаетсопряженность окисления с фосфорилированием и фотофосфорилированием, увеличивается активностьРНК-полимеразы,поверхностьвнутриклеточныхмембран,количество криствмитохондрияхиихразбухание.

Повреждающиетемпературыприводяткснижениюинтенсивностидыхания, каквдействии,такивпоследействии,нарушениюэнергообеспеченностиклеток, вплотьдоихгибели.Первопричинойповреждающеговлияниянизкихтемператур являетсяпереходмембранныхлипидовизжидкокристаллическогосостоянияв гель,чтоприводитксжатиюмолекул,увеличениюпорипроницаемостимембран, втомчислелизосом,возрастаетактивностьгидролитическихферментов.

ИРИНА КРАСОВСКАЯ

Мемориальныймузей-квартираК.А.ТимирязеваРГАУ–МСХА Тел:(495)695-80-64;(905)783-06-97;E-mail:info@timacad.ru Нижний Новгород – город, в котором работал талантливый исследователь, педагог, блистательный популяризатор, профессор Климент Аркадьевич Тимирязев(03.06.1843-28.04.1920).ВмузеехранятсяматериалыоВсероссийской промышленной и художественной выставке 1896 г. (июль-август): фото общего плана,вегетационного домика; служебный пропуск,почётныйбилет(выданный родственникомВас.Ив.Тимирязевым,министромторговлиипромышленности), два диплома о присуждении двух серебряных медалей за фотографии. После закрытиявыставкивегетационныйдомикбылперевезёнвПетровско-Разумовское дляД.Н.Прянишникова.

КлиментАркадьевичвстречалсясписателемМ.Горьким,вмузеехранитсяпапка сихперепиской.Наполкебиблиотекимузеяестькнига«Н.ИВавилов.Учениеоб иммунитетерастений.1918»сдарственнойнадписьюавтораКлиментуАркадьевичу.

Недавновкаталогепоявилиськарточкипубликацийд.б.н.ИриныВладимировны Красовской,работавшейнекотороевремявг.Горьком.

И.В. Красовская закончила ЛСХИ, проф. Н.И. Вавилов высоко оценил её дипломнуюработу(16.02.1924г.).В1926г.онаучаствовалавоВсесоюзномсъезде ботаников с самостоятельной работой и совместно с О.А. Вальтером и Н.Л.

Коссовичем. Она стала работать в ВИРе, изучать физиологию корневых систем.

Послеблестящейзащитыдокторскойдиссертацииивынужденногоувольнения изВИРав1935г.наследующийденьакадемикН.И.ВавиловввидеСправкидаёт ейзамечательнуюхарактеристику(неопубликованную).Е.Н.Синскаявспоминала (в1991г.):«Наеёдолюпришлосьчрезвычайномногомытарств,загодыизгнания она выполняла всевозможные работы, вплоть до доярки». Она была автором более пятидесяти трёх работ. Три из них посвятила К.А. Тимирязеву, прочитала первуюлекциюнаТимирязевскихчтенияхвСаратове.Онаучаствовалавсверке с оригиналом, в исправлении перевода книг: Дарвин Ч. Происхождение видов.

Изд.1-е,Сельхозгиз,М.,1935,переводК.А.Тимирязева,суказателямипообщей редакциейакадемикаН.И.Вавилова;изд.2-е,Сельхозгиз,1937,переводивводная статьяК.А.Тимирязева,подредакциейакадемиковН.И.ВавиловаиВ.Л.Комарова.

ОнажесделалавторойпереводнаанглийскийязыккраткогокурсаФизиологии растенийН.А.Максимова.1938.437с.

О И.В. Красовской (Теляковской) можно прочитать в переписке отца В.А.

Теляковского(быв.ДиректораИмператорскихтеатровСПб.иМосквы)сартистом А.И.Южиным-Сумбатовым.ПисьмаартистаК.А.Тимирязевунадругиетемыхранятся вмузее.

В 1920 г. вышло Постановление ВЦИК о принятии мер к сохранению в неприкосновенности кабинета, рукописей, библиотеки и создания способов увековечения памяти К.А. Тимирязева. 65 лет тому назад 27 апреля 1946 г.

Мемориальныймузей–квартираК.А,ТимирязевабылпереданвведениеМСХА им.Тимирязева.Бережноехранениематериалов–задачамузея.

ВЛИЯНИЕ ОСМОТИЧЕСКОГО СТРЕССА НА КАЛЛуСНЫЕ КуЛЬТуРЫ МЯГКОй

ПШЕНИЦЫ, уСТОйЧИВЫЕ К МЕТАбОЛИТАМ GAEUMANNOMYCES GRAMINIS

Effect of osmotic stress on the common wheat callus culture resistant to metabolites of Gaeumannomyces graminis var. tritici Дубровная О.В., бавол А.В., Лялько И.И., Зинченко М.А.

ИнститутфизиологиирастенийигенетикиНАНУкраины,г.Киев Тел:(044)257-51-50,Факс:(044)257-51-50;E-mail:dubrovny@ukr.net Биотехнологические методы в настоящее время широко используются для решенияприкладныхзадачселекциисельскохозяйственныхкультури,вчастности, мягкойпшеницы.Намивпервыебиотехнологическимпутемполученыкаллусные линиипшеницы,устойчивыекметаболитамвозбудителяофиоболлезнойкорневой гнили(G.graminisvar.tritici).Данныелинииотобраныпутемклеточнойселекциииз каллусовапикальноймеристемы3-суточныхстерильныхпобеговсортаЗимоярка, селекцииИФРГНАНУкраины.Цельюнашейработыбылоизучениереакцииэтих каллусныхлинийнамоделируемыйводныйдефицит.

Какселективныеагентыиспользовалиполиэтиленгликоль(ПЭГ)мол.массой 6000 или маннит. Для определения селективных концентраций маннита и ПЭГ каллус выращивали на среде МС с 0; 2,5; 5; 10; 15; 20; 25% ПЭГ и маннитом – 0;

0,6;0,8;1,0;1,2и1,4М.Входеисследованийанализировалиприростбиомассыи частотуобразованияморфогенногокаллусанасредахсразличнойконцентрацией осмотиков.

Ингибирование роста культуры отмечено при концентрации 2,5% ПЭГ, при этомнаблюдалиснижениеприростасыроймассыкаллусадо88,5%относительно контроля.Приросткаллусанасредес25%ПЭГбылнаименьшим,приэтомвыживало менее20%каллусов.Маннитвконцентрации0,6Мвызывалснижениеприроста массыкаллусаболеечемв2раза,однакоклеткиоставалисьживыми.Увеличение концентрации до 0,8 М подавляло роста еще сильнее – прирост сырой массы уменьшилсяболеечемв3раза,начастикаллусовпоявилисьзонынекроза.На средахс1,0и1,2Мманнитаросткаллусапрактическиотсутствовал.Летальной концентрациейманнитадляклеточныхлинийоказалась1,4М.

Насредахсразличнойконцентрациейосмотиковобразовывалсяморфогенный каллус. С увеличением концентрации селективного агента частота образования морфогенного каллуса постепенно снижалась. Однако, даже при наивысшей концентрацииПЭГ–25%,каллуснетерялспособностикморфогенезу.Вотличиеот селективныхсредсПЭГ,насредахсманнитомчастотаобразованияморфогенного каллусаснизилисьболеечемв2разаужеприконцентрации0,6М,однакочасть клетокосталасьживойисохраняласпособностькморфогенезу.Частотаобразования морфогенногокаллусанасредесконцентрациейманнитав1Мсоставляла2,3%.

Такимобразом,наоснованииэтихпредварительныхопытовдляпроведения клеточнойселекциинакомплекснуюустойчивостькданнымстрессовымфакторам намивыбранасистемаотборанасредесманнитом,посколькуобеспечилаполную элиминациючувствительныхклеток.

ВЛИЯНИЕ РОСТОСТИМуЛИРуЮЩИХ ПРЕПАРАТОВ ЭПИН И РИбАВ-ЭКСТРА

НА ОРГАНОГЕНЕЗ DIANTHUS CARYOPHYLLUS L. В КуЛЬТуРЕ IN VITRO

INFLUENCE GROWTH OF THE STIMULATING PREPARATIONS EPIN AND RIBAVEKSTRA ON ORGANOGENESIS DIANTHUS CARYOPHYLLUS L. IN CULTURE IN VITRO

ГОУВПОМордовскийгосударственныйуниверситетим.Н.П.Огарева,г.Саранск Тел:(8342)32-25-07;E-mail:Evmokshin@yandex.ru Возросшийспроснацветочныекультуры,втомчислевысокодекоративные многолетниегвоздики,вы-нуждаетискатьспособыполучениябольшогоколичества растений в короткие сроки. Одним из путей решения проблемы массового производствапосадочногоматериаладаннойкультурыможетстатьклональное микро-размножение in vitro. Данный метод позволяет намного уменьшить посадочныеплощади,приэтомвомногоразувеличиваякоэффициентразмножения растений,атакжесократитьвремявыращиваниянанесколькомесяцев.Однако для эффективного размножения гвоздики садовой с помощью культуры тканей требуетсяоптимизацияпроцесса,втомчислеподборэффективныхрегуляторов ростаиоптимальныхконцентраций.

Объектом исследования служили стерильные растения гвоздики садовой (Dianthus caryophyllus L.), сорт Silkroad. В качестве основной питательной среды использовалиагаризованную(0,7%)средусминеральнойосновойпоМурасиге и Скугу (рН 5,8-5,9), включающую витамины тиамин и пиридоксин (по 1 мг/л), аскорби-новуюкислоту(15мг/л),сахарозу(30г/л),регуляторыроста:эпин(10-7–10- %),рибав-экстра(10-7–10-2%).Вы-ращиваниеосуществлялипритемпературе25°Си круглосуточномосвещениибелымилюминесцентнымилам-памисинтенсивностью света3клк.,втечение8недель.

В результате исследования было выявлено, что все использованные концентрациирегуляторовростапо-зволяютиндуцироватьорганогенезугвоздики вусловияхinvitro.Использованиеэпинавконцентрациях10-6%и10-3%приводило к формированию максимального числа побегов на эксплант (5 штук), средняя длина которых составляла 30 мм. Применение рибава-экстра оказалось менее эффективнымсточкизрениявыходапобе-гов.Ихобразовывалосьв2разаменьше (2,5шт./эксплант)посравнениюсэпином.Однаковвариантахсконцентрациями данногопрепарата10-4%и10-3%.формировалисьпобегимаксимальнойдлины –85мм.

Следует заметить, что отмечались и морфологические различия в процессе органогенезаэксплантовнасредахсразнымирегуляторамироста.Так,насредес эпиномпобегирослиболеескученно,переплетаясьдругсдругом.Унихимелось большоеколичествовытянутых,водянистыхлистьев.Насредесрибавом-экстра побегибылиобособлены,имелидлинныестеблиименьшееколичестволистьев.

Таким образом, использованные регуляторы роста обладают комплексным действием и довольно эффективны. Их применение позволяет оптимизировать клональноемикроразмножениеD. caryophyllusL.invitro.

ВЛИЯНИЕ СЕЛЕНА НА АЦИДОФИЦИРуЮЩуЮ АКТИВНОСТЬ КЛЕТОК КОРНЕй.

Influence of selenium on activity of proton pumps of plasma membrane Саратовскийгосударственныйаграрныйуниверситетим.Н.И.Вавилова,.Саратов Тел:(8452)-233292,Факс:(8452)-264781;E-mail:plant-physiology@yandex.ru Дискуссионность вопроса о включения селена в число необходимых для растениймикроэлементовтребуетвсестороннегоизученияегофункцийвжизни растений.Поглощениеселенарастениями,хотяиможетпроисходитьизатмосферы, тем не менее, основное количество селена поступает в растение из почвы в видеионовSeO32-иSeO42-.Самымпервымэффектомселенаможетявлятьсяего воздействие на активность протонных насосов плазмалеммы корней. Изучение этоговопросаисоставилоцельнашейработы.

Вкачествеобъектамыиспользовалишестисуточныепроросткияровойпшеницы низкосолевогостатуса.Активностьпротонныхнасосовплазмалеммыклетоккорней определялиметодомрН-метриисреды,вкоторойинкубироваликорниисследуемых проростков. Проростки переносили в стаканчики с раствором 0,1 мМ CaSO4 + мМКСl(контроль),вопытныхрастворахсодержалисьтакжеионыSeO32-,SeO42-в концентрацииот10-4до10-7моль/дм3.ВприсутствииионовSeO32-вконцентрацииот 10-4М/дм3подкислениясредыненаблюдалосьвсевремянаблюдения,применьшей концентрацииSeO32-(10-5–10-6М/дм3)ацидофицирующаяактивностьчерез24часа составляла0,5-10%отконтроля.СамаянизкаяконцентрацияSeO32-врастворе(10- М/дм3)впервые4часаневлияланаацидофицирующуюактивностькорней,однако вдальнейшемонапостепенноснижа-ласьичерез24часасоставляла50-65%от контроля.Вотличиеотселенита,селенат-ионывменьшейстепениоказываливлияние наактивностьпротонныхнасосовклетоккорней.ПрисутствиеSeO42--врастворев концентрации10-4М/дм3приводиловпервые2часакснижениюацидофицирующей активностина10-15%,через6часовна45%,через24часана65%.Инкубациякорней врастворесSeO42-вконцентрации10-5М/дм3через24часаприводилакактивации ацидофицирующейактивностикорнейна10-15%.Активацияацидофицирующей активностинаблюдаласьвприсутствиивраствореSeO42-вконцентрации10-6М/ дм3всевремянаблюдения,начинаяс6часа.Онасоставлялавсреднем7%.Ионы SeO42-вконцентрации10-7М/дм3уженеоказываливлияниянаацидофицирующую активностькорней.Полученныерезультатымогутбытьобъясненысучетомпонимания различийвмеханизмепоглощенияилокализацииассимиляцииионовселенитаи селената.Посколькуселенит-ионывотличиеотселенат-ионовпослепоглощения ассимилируютсяисключительновкорнях,тостановитсяпонятнымихболеевысокая токсичность.Онаможетбытьсвязанасвлияниемнамембраныплазмалеммыселенцистеина, вызывающего образование свободных радикалов, не исключено, что включениеселен-цистеинавсоставбелковН+-АТФазыплазмалеммымоглоприводить кнарушениюеефункциональнойактивности.

РАЦИОНАЛЬНОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СОЛНЕЧНОй ЭНЕРГИИ И

ПРОТИВОСТОЯНИЕ ГЛОбАЛЬНОМу ПОТЕПЛЕНИЮ СЕЛЕКЦИЕй РАСТЕНИй

Rational use of solar energy and opposition to global warming by breeding of plant Институтхимическойфизикиим.Н.Н.СеменоваРАН,г.Москва Тел:(495)939-73-50;E-mail:vdushkov@yandex.ru При глобальном потеплении в севообороты, используемые на богаре, необходимо вводить культуры и сорта, гарантирующие получение урожая в засушливыегоды.ОнидолжнынаращиватьстокСО2иуспешнорешатьпроблему полученияизнихбиотоплива.

Длярешенияпроблемустойчивогоприродопользованияв1994г.,вглинистой полупустыне,в30кмотсоленогооз.Эльтон(околоДжаныбекскогостационараРАН) былоорганизованонаучно-внедренческоеобъединениеЭКО«Эталоннаяферма».

Используянаработкифундаментальнойиприкладнойнаукиспривлечениемученых РАН,РАСХНидругихподразделений,мыцеленаправленносоздали14защищенных авторскимисвидетельствамисортовс.х.растенийи3запатентованныетехнологии.

Нашисортазерновогосорго«Ишинское»и«Эльтонское»взасушливом г. на светло-каштановой почве (сухая степь, Волгоградская обл.) при урожае озимой пшеницы 31,0 ц/га, яровой пшеницы 5±1 ц/га и ячменя 7±1 ц/га, при широкорядном посеве, и 2-х культивациях междурядий, показали урожайность позерну,соответственно–35,0и34,5ц/га.Пообщейпродуктивностинадземной биомассы–72,4и74,2ц/га.

На южном черноземе в Пугачевском районе Саратовской области при сплошномсевесорго«Эльтонское»обеспечилоурожайность:взасушливом г–21ц/га,воченьсухом2009г–2-5ц/га,исухом2010г.–9,6-12,0ц/га.Данные показателипревосходилиурожайностьсамыхзасухоустойчивыхсортов–проса, ячменяинутав2-3раза.Вдополнениекзернусоргодалозначительнуюкормовую биомассу(сухойвесв1,5-2разавышезерна),котораясодержала5-6%сахарови хорошопоедаласьскотом.

По А.В. Алабушеву и нашим расчетам, замену зернофуражных и кормовых культурнасоргоследуетпровести:взонахсгодовымколичествомосадковв250мм–на40%,300-400мм–на20-25%и450-500ммна10-20%посевныхплощадей.

Всевооборотыстепныхрегионовнадобыстроввестисорговыекультуры,которые способныболееэффективноиспользоватьсолнечнуюэнергию(растениягруппыС4) применьшемпотребленииводы.Целенаправленнаяселекцияуказанныхсортовсорго наскороспелость,низкорослость,тонкостебельностьивысокоесодержаниекрахмала (до72%)подтвердилавозможностьупрощенногоиспользованияеговпроизводстве, существенногонаращиванияурожайности,биопродуктивности,стокаСО2иполучения (засчетвысокогосодержаниякрахмала)биоэтанола.

СОДЕРЖАНИЕ И СООТНОШЕНИЕ ХЛОРОФИЛЛОВ В ЛИСТЬЯХ ЗВЕРОбОЯ

ПРОДЫРЯВЛЕННОГО, ПуСТЫРНИКА ПЯТИЛОПАСТНОГО И ЭХИНАЦЕИ

Content and ratio of chlorophyll in leaves of Hypericum perforatum, Leonurus Дымина Е.В.1, баяндина И.И.1, Загурская Ю.В.2, Чеботарева Н.А. Новосибирскийгосударственныйаграрныйуниверситет,г.Новосибирск ИнститутэкологиичеловекаСОРАН,г.Кемерово Тел.:(383)-267-29-32,E-mail:dimina@ngs.ru Внастоящеевремяпроводятсяисследованияповыращиваниюлекарственных растений в промышленных регионах. В процессе адаптации к непривычным условиямсуществованиямогутпроисходитьизменениявметаболизмевеществ, продуктивностиикачествесырья.Цельюнашихисследованийбылопроведение оценки комплекса морфологических показателей и определение содержания и соотношения хлорофиллов в листьях некоторых лекарственных растений, выращенныхвчетырехрегионахЗападнойСибири.

Объектами наших исследований были три вида травянистых многолетних лекарственныхрастенийофициальноймедицины:Hypericum perforatum L.(зверобой продырявленный), Leonurus quinquelobatus Gilib. (пустырник пятилопастной), Echinacea purpurea(L.)Moench.(эхинацеяпурпурная).Растениябыливыращены рассадным способом из генетически однородных семян в четырех регионах ЗападнойСибири:Кемерово,Новосибирске,Камлаке(РеспубликаАлтай),Омске.

Полученыразличияпоморфологическимхарактеристикамрастенийпервого годажизни.РастенияHypericum perforatum, выращенныевНовосибирске,имели большееколичествопобегов,чемвКамлакеприодинаковыхразмерахлистьев.

РастенияLeonurus quinquelobatus изНовосибирскапревышалитаковыеизКамлака повсепараметрам.

Содержание и соотношение хлорофиллов «a» и «b» является показателем темпов роста, продуктивности и устойчивости растений к неблагоприятным факторам.НаибольшеесодержаниехлорофиллавыявленоуHypericum perforatum наАлтае.Востальныхрегионахколичествохлорофиллабылопочтиодинаковым.

Уменьшение соотношения хлорофиллов «а» к «b» у Leonurus quinquelobatus совпадаетсувеличениемпоказателейзагрязненияокружающейсредыврегионах, асуммахлорофиллов«а»и«b»коррелируетсморфологическимипоказателями растений.Количествохлорофилла«а»и«b»влистьяхEchinaceapurpureaдостоверно снижалось по регионам в направлении: Новосибирск, Омск, Кемерово, Алтай.

Соотношениехлорофилла«а»к«b»повариантамнеразличалась.

Такимобразом,растениявсехизученныхвидовимеютсобственныетенденции к изменению морфологических показателей и содержания и соотношения хлорофиллов«а»и«b»взависимостиотрегионовпроизрастания.

РаботаподдержанаРФФИ(грант№10-04-98011-р_сибирь).

ВНЕПЛАСТИДНЫЕ ПИГМЕНТЫ – АНТОЦИАНЫ В ЛИСТЬЯХ РАСТЕНИй НА СЕВЕРЕ

Anthocyanins as Extraplastid Pigments in Leaves of Northern Plants УчреждениеРоссийскойАкадемиинаукИнститутбиологииКоминаучного Тел.:(8212)24-96-87,Факс:(8212)24-01-63;E-mail:dymovao@ib.komisc.ru Антоцианы(АЦ)–группасоединенийфлавоноиднойприроды.АЦприсутствуют вразныхчастяхрастений,придаваяимоттенкикрасногоисинего.Вотличиеот хлорофилловАЦ–водорастворимыепигменты,локализуютсяпреимущественнов вакуоляхклетокэпидермылиста.Онисильнопоглощаютсветвобласти475–560нм, пропускаякрасныеисиниелучи.Функциональнаярольантоциановдосихпор остаетсядискуссионной.Считается,чтоихприсутствиенепрепятствуетпоглощению светахлорофилламивхлоропластахнижележащихслоевклетокмезофилла.По мнению некоторых авторов, АЦ влияют на световой внутриклеточный режим и способствуют более эффективному использованию солнечной энергии. Как и другие флавоноиды, АЦ хорошо поглощают УФ-радиацию, снижая тем самым опасность повреждения клеточных структур от губительного действия лучей коротковолновой части спектра. Гипотезы последних лет связывают также накопление АЦ с их антирадикальными, антимикробными и антифидантными свойствами.НамиисследованосодержаниеАЦвлистьях44видоврастенийразной жизненной формы, большинство из них – травы (73%). АЦ извлекали 1%-ным раствором соляной кислоты и определяли спектрофотометрически при длине волны 510 нм. Концентрация АЦ варьировала в широком диапазоне, от 0.1 до 3.0мг/гсухоймассы.МеньшевсегоАЦсодержалилистьяхвойных(лиственница, можжевельник).СредитравянистыхрастенийвысокоесодержаниеАЦотмечали у мытника мутовчатого, бартсии альпийской, вороники гермафродитной и представителей сем. толстянковые. Так, у очитка пурпурного концентрация АЦ достигала 4-5 мг/г сухой массы, что сопоставимо с содержанием зеленых пигментов.Снижениесоотношенияхлорофиллы/антоцианыотмечалиурастений на хорошо освещенных участках. Вместе с тем, концентрация АЦ в листьях теневыносливогорастенияживучкиползучей,обитающейподпологомлесаина осветленномместебылаодинаковой.Косени,снаступлениемночныхзаморозков регистрировализаметноеповышениеколичестваАЦвзимне-зеленыхлистьяху растенийизобоихэкотопов.Сдругойстороны,укультивируемыхрастенийржи послеосеннихзаморозковвыявилиснижение(в3раза)концентрацииАЦ.Таким образом,нашиданныесвидетельствуютозначительнойвидовойдифференциации ифенотипическойизменчивостисодержанияАЦурастенийнаСевере.

ДЕйСТВИЕ ФТОРИДА НАТРИЯ НА ФОТОСИНТЕЗ, ДЫХАНИЕ И СОДЕРЖАНИЕ

АТФ В ПРОТОПЛАСТАХ ARABIDOPSIS THALIANA

Effect of sodium fluoride on photosynthesis, respiration and ATP content in ГНУИнститутбиофизикииклеточнойинженерииНАНБеларуси,г.Минск Тел:+3750172842888;E-mail:ewdokimova@inbox.ru Известно,чтоАТФможетигратьрегуляторнуюфункциючерезперераспределение энергетическихпотоковвклеткеприразличныхусловияхфункционирования.Вэтой связибылоисследовановлияниеингибированиягликолизанафотосинтетическую активностьрастительнойклетки.Вкачествеингибиторабылиспользованфторид натрия, который подавляет енолазу – фермент, катализирующий превращение 2-фосфоглицерата в фосфоенолпируват. Исследовано действие фторида натрия наинтенсивностьтемновогодыхания,скоростьфотосинтетическоговыделения кислорода и уровень АТФ в мезофильных протопластах растений Arabidopsis thaliana.

Показано,что10-минутнаяинкубациясуспензиипротопластовсингибитором (5 мМ NaF) снижает интенсивность темнового дыхания на 43%. Скорость фотосинтетического выделения кислорода в опытных образцах была на 30% нижепосравнениюсконтрольными.Исследованиедействияфториданатрияна содержанияАТФпоказалозначительноеснижениеконцентрацииАТФвсуспензии протопластов,инкубируемыхсингибитором,посравнениюсконтрольными.При исследовании распределения АТФ по компартментам клетки хлоропластная и митохондриальнаяфракциинезначительноотличалисьотконтрольных.Наиболее значительное снижение уровня АТФ наблюдалось в надосадочной жидкости после осаждения с помощью дифференциального центрифугирования пластид и митохондрий, которая содержала преимущественно цитозольную АТФ. На основанииданныхрезультатовможнопредположить,чтоснижениеинтенсивности дыхания в результате ингибирования гликолиза приводит к значительному снижению содержания АТФ в цитозоле и изменению энергетического баланса клетки,чтоприводитвитогекподавлениюфотосинтетическойактивности.

ВЛИЯНИЕ ЛИПОПОЛИСАХАРИДА бАКТЕРИй AZOSPIRILLUM BRASILENSE

Sp245 НА ФуНКЦИОНАЛЬНуЮ АКТИВНОСТЬ КЛЕТОК КОРНЕВЫХ МЕРИСТЕМ

ПШЕНИЦЫ

Effect of Azospirillum brasilense Sp245 lipopolysaccharide on the functional Евсеева Н.В., Матора Л.Ю., бурыгин Г.Л., Дмитриенко В.В., Щеголев С.Ю.

УчреждениеРоссийскойакадемиинаукИнститутбиохимииифизиологии растенийимикроорганизмовРАН,г.Саратов Тел:8(8452)97-04-74,Факс:8(8452)97-03-83;E-mail:evseeva@ibppm.sgu.ru Бактерии рода Azospirillum представляют собой широко используемый модельный объект в исследованиях феномена растительно-микробной ассоциативности, в которых особенно актуальным является выявление клеточных структур, играющих ключевую роль во взаимодействиях партнеровассоциантов. Следует заметить, что в настоящее время мало внимания уделяется функционированию апикальных корневых меристем растений при их взаимодействии с микроассоциантами, хотя именно эти органы являются образовательными и регулирующими центрами растения-хозяина, а также представляютсобойодноизосновныхместлокализацииассоциативныхбактерий.

Былиизученыизмененияфизиолого-биохимическихпараметров6-суточных проростков пшеницы сорта Саратовская 29 (Triticum aestivum L.) при обработке корневой системы растений липополисахаридом (ЛПС), выделенным из внешней мембраны ассоциативных бактерий Azospirillum brasilense Sp245.

Полученныеданныесравнивалисьсрезультатамиинокуляциирастенийцелыми бактериальнымиклеткамиэтогоштамма(108кл/мл),атакжесвлияниемЛПСицелых клетокэнтеробактерийEscherichia coliK12испецифическогосимбионтарастений семейства бобовых Rhisobium leguminozarum 249. Функциональную активность меристематическихклетокоценивалипоопределениюихмитотическогоиндекса ипорезультатамиммунохимическогоопределенияпролиферативногоантигена инициалей(ПАИ)–молекулярногомаркерамеристематическихклетокпшеницы.

Учитывалисьтакжефизиолого-морфологическиепараметры(длинапобега,длина корневойсистемы,сухаямассакорнейипобега)Былопоказано,чтоприобработке корневой системы проростков ЛПС азоспирилл (конц. 10 мкг/мл) увеличивался митотическийиндексклеток(в1.8раза)иповышалосьсодержаниевнихПАИ(в1, раза),чтобылосопоставимосвоздействиеминокуляциицелымиклетками(в2and 1.4раза,соответственно).Вдругихвариантахопытанебылоотмеченодостоверных различийвзначенияхмитотическогоиндексаивсодержанииПАИвклеткахпо сравнениюсконтролем.ПолученныеданныедаютоснованиерассматриватьЛПС какактивныйкомпонентклеточнойповерхностиазоспирилл,которыйучаствует в индукции ответа растений на взаимодействие с бактериями. Обсуждается вопрососвязиПАИстрансдукциейгормональногосигналавклетке.Полученные результаты дают основание оценивать информативность определения ПАИ в качествепоказателяэффективностирастительно-бактериальныхвзаимодействий.

ВЛИЯНИЕ ИОНОВ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ НА бИОХИМИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ В

КАЛЛуСАХ И РАСТЕНИЯХ РЕДИСА И ОГуРЦА

EFFECT OF НЕAVY METALS IONS ON BIOCHEMICAL PROCESSES IN RADISH AND

CUCUMBER CALLUSES AND PLANTS

Тел:8(8342)32-25-23;E-mail:i.v.egorova@yandex.ru Резкоусилившеесявпоследниедесятилетиявлияниетехногенныхфакторовна окружающуюсредупривелоктому,чтомногиерастительныесообщества,популяции иотдельныерастенияпостоянноилипериодическиподвергаютсянеблагоприятным воздействиям,средикоторыходноизглавныхместзанимаюттяжелыеметаллы(ТМ).

ТМоказываютстрессовоевоздействиенарастения,приводящеекразличнымфизикохимическиманомалиямвклетках,повреждениюструктуриметаболическихфункций, снижениюобразованияорганическоговещества.Известно,чтовусловияхстресса ТМвозрастаетобразованиеактивированныхформкислорода,атакжеизменяется функционированиезащитнойсистемырастительныхклеток,компонентамикоторой являются низкомолекулярные антиоксиданты и ферменты. Однако неизвестно, отличаетсялистратегиязащитыотокислительногостресса,вызванногодействием ТМ,науровнеклеток(приихкультивированииin vitro)оттой,котораявыявленав интактныхрастениях.

Цель работы: сравнение реакций редиса (Raphanus sativus L., сорт Красный Великан)иогурца(Cucumis sativumL.,сортЕдинство)настрессовыевоздействия различныхконцентрацийТМ(Cu,Zn,Ni,Pb)вусловияхin vitroиin vivo.

Из стерильных растений вычленяли экспланты, на которых после посадки на питательную среду Мурасиге-Скуга (МС) с добавлением 30 г/л сахарозы, витаминовВ12иВ6(по1мг/л),никотиновойкислоты(0,5мг/л),глицина(2мг/л), мезоинозита(100мг/л),2,4-Д(2мг/л)и6-БАП(2мг/л)формироваласькаллусная ткань.КаллусыпересаживалинасредуМСсдобавлениемразличныхконцентраций (от 10-5 до 10-3 М/л) CuSO4*5H2O, ZnSO4*7H2O, NiSO4*7H2O, Pb(NO3)2. Стерильные семена проращивали на воде с добавлением таких же концентраций солей ТМ.

В 5-недельных каллусах и 7-дневных растениях измеряли динамику изменений активностиферментов,скоростьгенерациисупероксидногоанион–радикала(О2.-) иинтенсивностьперекисногоокислениялипидов(ПОЛ).

Показано,чтоТМвызываютусилениегенерацииО2.-;иинтенсивностиПОЛ,а такжеизмененияактивностиантиоксидантныхферментов;однаконаправленность иинтенсивностьбиохимическихпроцессовварьироваливзависимостиотиона ТМ,егоконцентрации,атакжеразличалисьвкаллусныхтканяхирастениях.

Исследование выполнено при поддержке Федерального агентства по образованию (АВЦП «Развитие научного потенциала высшей школы», проект 2.1.1/624).

ПРОТЕОМНЫй АНАЛИЗ КОНКуРЕНТНЫХ ВЗАИМООТНОШЕНИй МЕЖДу

САЛИЦИЛОВОй КИСЛОТОй И МЕТИЛЖАСМОНАТОМ

Proteomic analysis of competitive relationships between salicylic acid and УчреждениеРоссийскойакадемиинаукКазанскийинститутбиохимиии биофизикиКазанскогонаучногоцентраРАН,г.Казань Тел:(843)2927977,Факс:(843)2927347;E-mail:alevtinaegorova@gmail.com Салициловая (СК) и жасмоновая (ЖК) кислоты – стрессовые фитогормоны растений, принимающие участие в их защите, соответственно, от биотрофных и некротрофных патогенов. При исследовании влияния этих соединений на иммунитетобычнообнаруживалисьантогонистическиевзаимоотношениямежду ними,однакопринизкихконцентрацияхСКиЖКнаблюдалсясинергическийответ растений.Внастоящеевремявниманиеисследователейпривлекаютмолекулярные механизмы СК- и ЖК-активации и подавления экспрессии различных генов. Мы поставилипередсобойцельвыяснить,каковыособенностивзаимовлиянияСКи метилжасмоната(МеЖК)наинициируемыеимиболеепоздниеэтапысигнальных потоков–наизменениеспектроврастворимыхбелковкорнейгороха.

Для разделения белков использовали двумерный электрофорез, для их идентификации–масс-спектрометрическийанализ.

СКиМеЖКвызывали,главнымобразом,специфические,новнекоторыхслучаях, однонаправленные изменения содержания белков. СК вызывала повышение и, в меньшей степени, снижение экспрессии ряда белков, среди которых нами идентифицированы белки, участвующие в синтезе, рефолдинге и деградации белков,всигналинге,защитныхреакцияхидр.МеЖКиндуцировалаизменение экспрессиименьшегоколичествабелков,посравнениюсСК.

Совместное действие СК и МеЖК приводило к суммированию эффектов изменения содержания белков, характерных для раздельного действия этих фитогормонов.Наблюдалось, например,повышениеэкспрессии маркерных СКиндуцируемогобелка32кДаиМеЖК-индуцируемогобелка20кДа.Приобработке корнейсначалаМеЖК,азатемСК,снижалосьсодержаниемаркерныхкакМеЖКиндуцируемых,такиСК-индуцируемыхбелков,причемвменьшейстепени–первых.

Последовательная обработка корней проростков гороха сначала СК, а затем СК+МеЖКприводилакподавлениюэкспрессиинесколькихМеЖК-индуцируемых белков,нонеСК-индуцируемых.Выявленантагонизмвэкспрессиирядабелков.

Таким образом, специфика реакции протеомов определяется не только концентрациями исследовавшихся фитогормонов, но и последовательностью действияСКиМеЖК:предобработкаоднимизэтихсоединенийподавляетответ надействиедругого,носовместноеихдействиеприводитксуммированиюответа.

Работа поддержана грантом РФФИ №10-04-01281 и грантом Президента Российской Федерации по государственной поддержке ведущих научных школ НШ-6992.2010.4.

ИЗМЕНЕНИЕ ПРОДуКТИВНОСТИ ЭКОСИСТЕМ ЕВРОПЕйСКОГО СЕВЕРА

ПОСЛЕДНИХ ДЕСЯТИЛЕТИй. АНАЛИЗ ВЗАИМОСВЯЗЕй ГАЗОМЕТРИЧЕСКИХ И

The estimation of vegetation production at European North. The analise of relations satellite images and CO2 gas-exchange data ИнститутбиологииКомиНЦУрОРАН,г.Сыктывкар Тел.:8212-216752,Факс:8212-216752;E-mail:elsakov@ib.komisc.ru Серииработ,выполненныхвфитоценозахАрктическогорегиона,демонстрируют наличиетеснойкоррелятивнойсвязимеждуобъемамипоглощеной/отраженной растительнымпокровомэнергиивдиапазонахкрасногоиближнегоинфракрасного излучения,поглощеннойфотосинтетическиактивнойрадиациейипродуктивностью сообществ (NPP). Все это позволяет рассматривать спектральные показатели и широкоиспользуемыйиндексNDVIвкачествевеличин,отражающихинтенсивность фотосинтетическиобусловленныхСО2–потоков,аихсезоннуювариабельностькак показательпродуктивности.Вбольшейстепенизначенияспектральныхвеличин отдельныхучастковопределяютсявеличинамихлорофильногоиндекса(XИ).Для тундровыхсообществпроективноесодержаниехлорофиллавсреднемоценены в пределах около 0.35 г/м2 (Воронин, 2006), при этом, наблюдается снижение величиныХИвнаправлении:злаковые(1.18г/м2) кустарниковые(0.75-0.90г/м2) воронично-ерниковые(0.58г/м2)кустарничково-моховые(0.36г/м2)сообщества (Шмакова,Кудрявцева,2002).

Сочетание методов полевой газометрии с использованием инфракрасного газоанализатораLiСor-6200(Nebraska,USA)сданнымиспектральныхвеличинпо спутниковым данным, полученным на один момент съемки, для одних и тех же фитоценозов показал, что между первичной продукцией (GP) и спектральными параметрами(вчастностииндексамиVI,NDVIидр.),прослеживаютсязначимые тесныеположительныекорреляции(0.8-0.92).

Это позволяет оценить ландшафтные особенности фотосинтетической аккумуляции углерода зеленой фитомассой и оценить вклад отдельных жизненных форм растений в общий баланс продуктивности. Использование данныхспутниковыхизображенийвоценкепродуктивностиназемныхэкосистем всравнениисинструментальнымигазометрическимиизмерениямисущественно нивелироваловариабельностьзначенийвсилупространственнойгенерализации спектрозональныхданныхиобщейгенерализацииданныхполученныхнауровне организмов(кпримеру,содержаниехлорофилланаединицуплощадидляцелых сообществварьируетвменьшейстепени,чемвотдельныхрастенияхиихчастях).

Цельпредставленногодокладасостоитвкомплекснойоценкеособенностей аккумуляции углерода в растительном покрове фитоценозов Европейского Северазапериодпоследнихдесятилетийивыявлениезначимыхизмененийв связисглобальнымиклиматическимиизменениями.

РОЛЬ САЛИЦИЛОВОй КИСЛОТЫ В РЕГуЛЯЦИИ МЕХАНИЗМОВ

АДАПТАЦИИ РАСТЕНИй К НЕДОСТАТКу КИСЛОРОДА И ПОСЛЕДуЮЩЕМу

ОКИСЛИТЕЛЬНОМу СТРЕССу

The role of salicylic acid in the regulation of plant adaptation mechanisms to the Емельянов В.В.1, Ласточкин В.В.1, Слюсаренко А.И. Санкт-Петербургскийгосударственныйуниверситет,биолого-почвенный факультет,кафедрагенетикииселекции,г.Санкт-Петербург Рейн-Вестфальскийвысшийтехническийуниверситет,г.Ахен,Германия Тел:(921)9891421,Факс:(812)3281590;E-mail:bootika@mail.ru Салициловая кислота (СК) – фитогормон, принимающий участие в развитии системнойприобретеннойустойчивостииреакциисверхчувствительности.Наряду сэтим,накапливаетсявсебольшеданныхововлеченностиСКврегуляциюроста и развития растений, а также их устойчивости к разнообразным абиотическим воздействиям: тяжелым металлам, засолению и повышенным температурам. В отношениидействияаноксииипоследующегоокислительногострессаподобные данныевлитературеотсутствуют.

В нашей работе исследовано эндогенное содержание СК, а также влияние экзогенной обработки на жизнеспособность и окислительные процессы в проросткахпшеницы(Triticum aestivumL.)ириса(Oryza sativaL.)прианоксииипри аэрациивпост-аноксическийпериод.ПредобработкупроростковСКпроводилив течение24ч,послечегорастениянасуткипомещаливусловияаноксии.

Установлено,чтоподдействиемСКуровеньперекисногоокислениялипидов (ПОЛ)ипродукцияН2О2впроросткахпшеницывусловияхреаэрацииснижались.

Выход электролитов из корней проростков уменьшался на 10%, в то время как из побегов – не изменялся. Тест на жизнеспособность по восстановлению тетразолиевых красителей показал большую сохранность предобработанных растений в условиях аноксии и последующей реаэрации. Таким образом, на неустойчивоеканоксиирастениепшеницыСКоказывалазащитноедействие,что согласуетсясданнымиодругихвидахстресса.

На проростки риса обработка СК оказывала иное воздействие. Уровень ПОЛвпроросткахувеличивался,апродукцияН2О2почтинеизменялась.Выход электролитов из клеток корней возрастал на 10%, а в побегах, наоборот, – уменьшалсяна5%.Тетразолиевыйтестневыявилизмененийвжизнеспособности, связанных с обработкой СК. Следовательно, у растения, устойчивого к данному видустресса,дополнительноевнесениегормонанеоказывалоположительного эффектапосравнениюснеустойчивым.

В связи с этим, было изучено эндогенное содержание этого фитогормона, котороевпобегахпроростковрисаоказалосьв20развыше,чемупшеницы,и неизменялосьподдействиеманоксии.Вероятно,характерныйдлярисавысокий эндогенныйуровеньСКможетбытьсвязансегоустойчивостьюккислородной недостаточностиипоследующемуокислительномувоздействию.

РаботавыполненаприфинансовойподдержкеМинистерстваобразованияинауки врамкахреализацииФЦП«Научныеинаучно-педагогическиекадрыинновационной России»на2009-2013годы(2010-1.1-202-059)иРФФИ(10-04-01035а).

КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ВЗАИМОСВЯЗЬ МЕЖДу ЭНЕРГЕТИЧЕСКИМ И ПРО/

АНТИОКСИДАНТНЫМ бАЛАНСАМИ у РАСТЕНИй ПШЕНИЦЫ ПРИ

ВОЗДЕйСТВИИ РАЗЛИЧНЫХ КОНЦЕНТРАЦИй КАДМИЯ

Quantitative relationship between energy and pro/antioxidant balances in wheat plants under the influence of different concentrations of cadmium Башкирскийгосударственныйуниверситет,г.Уфа Тел:(347)273-67-12;E-mail:alexrl87@mail.ru Стрессовые факторы, в том числе тяжелые металлы (ТМ), индуцируют образованиеактивныхформкислорода(АФК).Основнымиместамиобразования АФК в растительных клетках являются энерготрансформирующие процессы:

фотосинтезидыхание,которыеопределяютэнергетическийбалансрастительного организма.Цельданнойработы:выявлениеколичественныхкорреляциймежду параметрамиэнергетическогоипро/антиоксидантногобалансов.

Исследовали влияния повышенных концентраций ТМ – кадмия (Cd) – на ростовые, энергетические и про/антиоксидантные параметры 14-дневных растений пшеницы (Triticum aestivum L.). Для создания условий повышенного содержания металлов в питательную среду добавляли нитрат кадмия (CdNO3) в 3-хконцентрациях–150мкМ,600мкМи1500мкМ,-превышающихПДКв40, и400раз,соответственно.Определялинакоплениесыройисухоймассыпобегов и корней, содержание конечного продукта перекисного окисления липидов – малоновогодиальдегида(МДА),рассчитывалиотносительнуюскоростьроста(RGR), долюсуммарныхдыхательныхзатратотгроссфотосинтеза(R/Pg).

Показано,чтоприувеличенииконцентрацииCdвпитательнойсредеотносительная скоростьростаснижаласьв1,6,2,5и2,7раз,ивозрасталадолясуммарныхдыхательных затрат–в1,1,1,4и1,5раз,соответственно.МеждуизменениямиRGRиR/Pgпристрессе выявленаотрицательнаякорреляция(r=-0,93,прир0,05).Вероятно,этосвязанос тем,чтопараллельнососнижениемростовыхпараметровпроисходитвозрастание интенсивностидыханияподдержаниязасчётадаптационнойсоставляющейнафоне сниженияинтенсивностидыханияростаигроссфотосинтеза.Такжеобнаруженатесная положительнаясвязьмеждуотношениемR/PgисодержаниемМДАвкорнях(r=0,94, прир0,05).Полученныеданныесвидетельствуютотеснойсвязимеждунарушением энергетическогобалансаисостояниемпро/антиоксидантногостатусапривысоких концентрациях Cd. Вероятно, изменения интенсивности фотосинтеза и дыхания принеблагоприятныхусловияхприводятквозникновениюсверхэкспрессииАФКи включениюмеханизмовредокс-регуляции,способствующихустановлениюнового соотношенияR/Pg.

СубКЛЕТОЧНАЯ ЛОКАЛИЗАЦИЯ ИЗОФЕРМЕНТОВ ИЗОЦИТРАТЛИАЗЫ,

ИДЕНТИФИКАЦИЯ ГЕНОВ icl1 И icl2 И ИХ ЭКСПРЕССИЯ В С3- И С4РАСТЕНИЯХ.

Subcellular localization of isoenzymes isocitrate lyase, identification of genes icl1 and icl2 and their expression in С3- and С4- plants.

Епринцев А.Т., Сальников А.В., Куен Ч.Т.Х., Хаба А.М., Лыкова Т.В.

ВГУ,Воронежскийгосударственныйуниверситет,г.Воронеж Тел:(473)2208877;E-mail:biolog1987@rambler.ru Изоцитратлиаза (ИЦЛ, КФ 4.1.3.1.), являясь одним из ключевых ферментов глиоксилатногоцикла,обеспечиваетрастительныйорганизмвусловияхгетеротрофного питаниядоступнымиуглеводами,участвуявважномэтапеглюконеогенеза.

Однакопоявилисьданныеоналичиидвухизоформизоцитратлиазыурастений на начальных этапах прорастания семян. В связи с этим целью работы явилось исследованиесубклеточнойлокализации,изоферментногосостава,идентификация геновicl1иicl2,атакжеихэкспрессиивС3-иС4-растениях.

Объектамиисследованияслужиликукуруза(Zea maysL.)исояразличныхсортов (Glycine max L.)иамарант(Amaranthus caudatus L.).

Исследование субклеточной локализации ИЦЛ проводили с помощью дифференциальногоиизоплотностногоцентрифугирования.Дляидентификации геновicl1иicl2осуществлялиполимеразнуюцепнуюреакциюсгенспецифичными вырожденнымипраймерами,подобранныминаосновесравненияаминокислотных последовательностейИЦЛизразныхорганизмов.ДляПЦР-анализаиспользовали праймеры:прямой5_GTGGNCATATGGGNGG-3_обратный– CTTCATTTTTANGC-3_Для изучения уровня экспрессии генов icl1 и icl2 и её измененияприменялиПЦРвреальномвременисиспользованиемгенспецифичных праймеровиSYBRGreenIвкачествекрасителя.Длякукурузыисоибылиподобраны следующие праймеры: icl1 – прямой 5_TCCCCTAGAGCGTTTCTGA-3_обратный 5_ATCGCACACCCACTTACCTC-3_icl2–прямой5_TCCCAGTCCCAGAA-3_обратный TCGAGGACGAGTGG-3_ Установлено,чтовнутриклеточнаялокализацияИЦЛвисследуемыхрастениях связана с глиоксисомальной, цитозольной и пероксисомальной фракциями.

В зеленых листьях активность сосредоточена в перексисомах и цитозоле.

ЭлектрофорезвПААГспоследующимспецифическимокрашиваниемвыявилдве изоформыИЦЛ.

ПЦР-анализ кДНК из кукурузы и сои с генспецифичными праймерами и последующий электрофорез в 1% агарозном геле выявил наличие двух полос на электрофореграмме, свидетельствующих об экспрессии двух генов ИЦЛ на начальныхэтапахонтогенезарастений.

Динамика экспрессионной активности генов icl1 и icl2 показала, что относительнаяконцентрациятранскриптовобоихгеновявляетсямаксимальной на 3-й день прорастания семян. Вероятно, в этот период наблюдается высокая интенсивностьглюконеогенетическихпреобразований.

Т.о.,висследуемыхрастенияхвыявленыдвемолекулярныеформыИЦЛ,имеющие различнуюгенетическуюдетерминированностьиобеспечивающиепротеканиеразных физиолого-биохимическихпроцессоввклетке.

ВЛИЯНИЕ МЕТИЛИРОВАНИЯ НА ЭКСПРЕССИЮ ГЕНОВ СубЪЕДИНИЦЫ В

СуКЦИНАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ

The influence of methylation on the genes expression of the succinate Епринцев А.Т., Федорин Д.Н., Селиванова Н.В., Дадакина И.В., Махмуд Али С.

Воронежскийгосударственныйуниверситет,г.Воронеж Тел:+7(473)2208-877,Факс:+7(473)2208755;E-mail:bc366@bio.vsu.ru ферментомметаболическихпутейрастений,поэтомувопросеерегуляции детально исследуется. Генетическая детерминация СДГ в геномах высших растений характеризуется наличием полигенного семейства. Поскольку каталитическийдимерсукцинатдегидрогеназыпредставленсубъединицами А и В, интересным представляется изучение механизмов регуляции их экспрессии при прорастании растений. В связи с этим, целью данной работыявилосьисследованиевлиянияметилированиянаэкспрессиюгенов субъединицыВСДГвщиткахкукурузы.

Поиск нуклеотидных последовательностей промоторов исследуемых геновосуществляливбазеданныхGeneBank,наихосновебылиразработаны высокоспецифичные праймеры для анализа экспрессии генов и метилспецифичнойПЦР.

Показано, что уровень транскрипции генов sdh2-1, sdh2-2 и sdh2- изменяетсяпомереразвитияпроростка.Генsdh2-3активноэкспрессируется в течение всего периода прорастания семян, тогда как гены sdh2-1 и sdh2- интенсивнотранскрибируютсявсухихсеменах,азатемпроисходитснижение данного показателя до полного его выключения. Профили экспрессии генов sdh2-1иsdh2-2имеютсходноепроявлениесгенамиферментов,вовлеченных в глюконеогенез. Данный факт позволяет предположить, что интенсивная экспрессиягеновsdh2-1иsdh2-2наначальномэтаперазвитиясемянявляется частью метаболической программы, позволяющей мобилизовать запасные вещества. Вероятно, экспрессия гена sdh2-3 связана с высокой скоростью функционированиядыханиянараннихстадияхразвитиясемян.

Для выяснения механизмов дифференциальной экспрессии генов субъединицыВСДГприпрорастаниисемянкукурузыбылапроанализирована степеньметилированияихпромоторов,какодинизвозможныхрегуляторных механизмов.СтепеньметилированияисследуемыхCG-динуклеотидов,входящих всоставгеновsdh2-1,sdh2-2иsdh2-3,оставаласьпостояннойнапротяжении всеговремениэксперимента.Полученныеданныепоказали,чтометилирование промоторовиграетнезначительнуюрольврегуляцииэкспрессииисследуемых генов.

Т.о., обнаруженная дифференциальная экспрессия генов субъединицы полифункциональностью данной ферментной системы и ее участием в различных метаболических процессах в онтогенезе растений. Частичное метилирование промоторов генов, кодирующих субъединицу В СДГ, при прорастаниисемянкукурузысвидетельствуетоегопассивностиврегуляции экспрессииисследуемыхгенов.

ВЛИЯНИЕ СОЛЕВОГО СТРЕССА НА ФуНКЦИОНИРОВАНИЕ НАД- И НАДФЗАВИСИМЫХ МАЛИК-ЭНЗИМОВ В ДИФФЕРЕНЦИРОВАННЫХ ТКАНЯХ

The salt stress effect on function NAD- and NADF-depended malic-enzymes in Епринцев А.Т., Федорина О.С., Ассиль Мундер Хаба, Лыкова Т.В.

Воронежскийгосударственныйуниверситет,г.Воронеж, Тел:(84732)208877,факс+7(473)2208755;E-mail:bc366@bio.vsu.ru Малик-энзимы(МЭ),играющиеведущуюрольвметаболизметканейС4-растений, участвуют в цикле Хетча-Слейка, определяя принадлежность к энзиматической группе, и выполняют целый ряд анаплеротических реакций позволяющих организму уменьшить зависимость от гликолиза при образовании энергии и синтезеуглеродныхскелетов,чтодаетопределенныепреимуществапристрессе.

Цельюработыбылоизучитьвлияниехлоридногозасолениянаактивностьи изоферментный состав НАД- и НАДФ-зависимых малик-энзимов в разделенных тканях С4-растений. Объектом исследования служили 10-дневные проростки кукурузы (Zea mayse L.), сорго (Sorghum bicolor L.) и проса (Panicum miliaceum, L).

Активностьферментовопределялиспектрофотометрически,изозимныйспектр– методомэлектрофорезапоДевисуспоследующимспецифическимокрашиванием.

Выявлено, что засоление приводит к активации НАД-МЭ в мезофилле всех изученныхрастений,атакжевклеткахобкладкикукурузыипроса,тогдакаквкранцклетках сорго наблюдается ингибирование данного фермента. Установлено, что значительнаядоляиндуцированнойактивностиНАДФ-МЭвтканяхкукурузы(малатный тип)приходитсянаклеткимезофилла,авобкладкеегоактивностьподавлена.Такое перераспределение,вероятно,открываетдополнительныевозможностиреализации адаптивногоответамезофиллауданныхрастений.Упредставителейнемалатного типа(соргоипросо)наблюдаласьинтенсификацияданногоферментавобеихтканях, чтоможетбытьсвязаносрегенерациейНАДФНдлябиосинтетическихпроцессови возможносинтезомпируватазасчетдекарбоксилированияОАА.Анализполученных электрофореграммНАД-иНАДФ-МЭпоказал,чтовомногихслучаяхинтенсификация активностиэнзимовсвязанаспоявлениемновыхизоформферментов.Наиболее вариабельныизозимныеспектрыНАД-МЭ,причемусоргостресс-индуцированные измененияизоферментногосоставаданногомаликэнзимазатрагивалиобеткани,у кукурузыиндуцибильныеформыобнаруживалисьтольковобкладке,аупроса–лишьв мезофильнойткани.Втканяхсоргосолевойстрессвызывалпоявлениедополнительных изозимовНАДФ-МЭ,тогдакаквостальныхрастенияхизоферментныйсоставНАДФ-МЭ оставалсястабильнымпризасолении.

Таким образом, солевой стресс существенно влияет на функционирование малик-энзимов.Интенсификацияактивностииизменениеизоферментногосостава вбольшинствеизученныхслучаевзатрагиваетформыферментов,выполняющих анаплеротические реакции, тогда как малик-энзимы, участвующие в цикле Хетча-Слейкаболееконсервативны.

ИЗМЕНЕНИЕ уРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ, КОДИРуЮЩИХ ИЗОФОРМЫ

Н+-АТФазы ПЛАЗМАЛЕММЫ В ГИПОКОТИЛЕ ARABIDOPSIS THALIANA В ХОДЕ

РОСТА РАСТЯЖЕНИЕМ

Alterations in the expression level of genes encoding plasma membrane Н+ATPase isoformes in Arabidopsis thaliana hypocotyls within elongation growth Еремина М.А., Савельева Н.В., Прокопьева Ю.П., Шишова М.Ф.

Санкт-Петербургскийгосударственныйуниверситет,г.Санкт-Петербург Тел.:(812)328-96-95.Факс:(812)328-97-03;Е-mail:ma.eremina@gmail.com Рострастяжениемявляетсяспецифичнойособенностьюрастительныхклеток исвязансактивациейпротоннойпомпы,функциюкоторойвыполняетфермент Н+-АТФазаплазмалеммы.Согласногипотезе«кислогороста»,входеработыэтого фермента происходит индукция транспорта ионов Н+ из клетки. Экскреция протоновобусловливаетуменьшениеpHапопласта,чтоведеткактивацииряда гидролитическихферментовклеточнойстенкиикпоследующемуизмененияюее свойствисостава,инициируяувеличениеразмеровклетки.Такимобразом,можно предположить,чтоинтенсивностьработыН+-АТФазыплазматическоймембраны является одним из факторов, регулиющих интенсивность процесса клеточного ростарастяжением.

Н+-АТФазаплазмалеммыкодируетсягруппойгенов,числокоторыхварьирует в зависимости от вида растения. Для модельного организма Arabidopsis thaliana по результатам секвенирования генома идентифицированы 11 генов, кодирующих изоформы Н+-АТФазы, названные AHA1-AHA11. Установлено, что изоформыН+-АТФазыимеютразныебиохимическиесвойстваиэкспрессируются тканеспецифично,однаководнихгруппахклетокитканеймогутэкспрессироваться несколькоизоформ.

Согласноранееполученнымданным,гидролитическаяактивностьН+-АТФазы плазмалеммыизменяетсявходеонтогенезарастительнойклеткиимаксимальна в период наиболее интенсивного роста растяжением. Можно предположить, что данное увеличение активности связано с повышением экспрессии генов, кодирующихН+-АТФазуисоответственно,сувеличениемколичестваферментав плазмалемме,либоэтообъясняетсяусилениемактивностиужесуществующегочисла Н+-АТФаз.Дляподтвержденияпервогопредположениянамипроанализирована экспрессиярядагенов,кодирующихизоформыН+-АТФазыплазмалеммы.

Экспериментыпроводилисиспользованиемгипокотилей A. thaliana,которые проходятпериодинтенсивногоростарастяжениемс5на6деньэтиолированного развития.МетодомПЦРвреальномвременисизоформоспецифичнымипраймерами проанализированаэкспрессиягенов,кодирующихAHA1иAHA8изоформыН+-АТФазы плазмалеммы в гипокотилях A. thaliana. Показано, что гипокотили 6-суточных проростков арабидопсиса характеризовались наибольшей интенсивностью экспрессииобоихпротестированныхгенов.Замедлениеростовыхпроцессов(9-е суткиразвития)отличалосьснижениемэкспрессии.Темсамым,выявленакорреляция интенсивностейэкспрессииизоформН+-АТФазыиростовыхпроцессов.

СТРуКТуРНЫЕ ОСОбЕННОСТИ ДИВИНИЛЭФИРСИНТАЗЫ ТАбАКА

(NICOTIANA TABACUM)

Structural feature of tobacco divinyl ether synthase (Nicotiana tabacum) Ермилова В.С., Осипова Е.В., Ланцова Н.В., Гоголев Ю.В., Гречкин А.Н.

КазанскийИнститутБиохимиииБиофизикиКазНЦРАН,г.Казань Тел:(843)231-90-35,Факс:(843)292-73-77;E-mail:ntdes@mail.ru В процессе жизнедеятельности растения постоянно нуждаются в защите от различных стрессовых факторов. Важную роль в защитной системе растений играетлипоксигеназныйпутьметаболизмажирныхкислот.Урастенийпродукты этого пути – оксилипины – вовлечены в восстановление повреждений, формирование защитного ответа на атаку вредителей и сигналинг. Первой стадией липоксигеназного пути является реакция окисления линолевой или линоленовойкислот,катализируемаяферментомлипоксигеназой.Образующиеся гидроперекиси жирных кислот являются высоко реактивными и опасны для растения,поэтомувдальнейшемониметаболизируютсярядомферментов,втом числеферментамисемействаCYP74цитохромовР450:алленоксидсинтазами(АОС), гидропероксидлиазами(ГПЛ)идивинилэфирсинтазами(ДЭС).Продуктыреакций, катализируемыхДЭС,обладаютантимикробнымифунгициднымдействием.Так, колнелеваяиколнеленоваякислотыврастенияхтабакаингибируютростмицелия иразвитиеспорпатогенныхгрибов.

Ферментам данного семейства свойственна высокая степень гомологии аминокис лотных пос ледовательностей. Несмотря на это, механизмы катализируемых реакций различны: ДЭС и АОС являются дегидразами, ГПЛ – изомеразой.Предполагается,чтовактивномцентреэтихферментовимеетсяряд аминокислотных остатков, играющих важную роль в механизмах катализа. Мы модифицировали первичную последовательность дивинилэфирсинтазы NtDES табака методом сайт-направленного мутагенеза с целью проанализировать изменениявмеханизмекаталитическойреакцииврезультатеединичнойзамены вактивномцентре.

Для получения препаратов рекомбинантного фермента дикого типа и его мутантныхформнамибылаоптимизированагетерологическаясистемаэкспрессии.

Масс-спектрометрический анализ продуктов реакции мутантных форм ДЭС с субстратом (9S)-гидроперекисью линолевой кислоты показал присутствие нехарактерныхдляДЭСдикоготипапродуктовреакции.

Вероятно,геныГПЛ,АОСиДЭСмогливозникнутьнараннихэтапахэволюции растений благодаря отдельным точечным мутациям в последовательности анцесторногогена.Закреплениеэтихмутацийпроисходилоблагодаряпродуктам реакции,которыеспособствоваливыживаемостииадаптациирастений.Впользу этогопредположениясвидетельствуетвысокаястепеньгомологииаминокислотных последовательностейэтихферментовводноморганизмеизначительноеразличие ферментов у растений разных видов. Результаты данной работы на примере последовательностиNtDESслужатподтверждениемданнойгипотезы.

НЕМОНОТОННЫЕ ЗАВИСИМОСТИ «ДОЗА-ЭФФЕКТ» ПРИ АДАПТАЦИИ

РАСТЕНИй К ХИМИЧЕСКОМу ЗАГРЯЗНЕНИЮ ОКРуЖАЮЩЕй СРЕДЫ

Nonmonotonic «dose-effect» dependencies under plant adaptation to chemical Нижегородскийгосударственныйуниверситетим.Н.И.Лобачевского, Тел:8(831)4656243,Факс:8(831)4652208;E-mail:ele77785674@yandex.ru В настоящее время установлено, что кроме классических монотонных зависимостей «доза-эффект» (S-образных; экспоненциальных), при действии различныхфакторовнабиосистемыдостаточночастовстречаютсянемонотонные ответы,ккоторым,вчастности,относятсягормезисипарадоксальныеэффекты.

Даннаяпроблемаявляетсямалоизученнойпридействиихимическогозагрязнения нарастения,несмотрянато,чтопоказателиихсостоянияширокоиспользуютсядля оценкикачестваокружающейсреды.Всвязисэтимвтечение1-3сезоноввегетации намибылоизученоизменениерядафизиолого-биохимическихиморфологических показателей состояния березы повислой (Betula pendula Roth.) при действии поллютантоввширокомдиапазонедозвестественныхусловиях.Приизучении влиянияавтотранспортногозагрязнениянауровеньфлуктуирующейасимметрии, интенсивностьлипопероксидации,содержаниехлорофилловикаротиноидови активностьантиоксидантнойсистемывлистеберезыбылиполученыдвухфазные и многофазные зависимости. При этом относительно невысокий уровень загрязнениязачастуюприводилкнарушениюгомеостазаберезы–увеличению уровняасимметрииилипопероксидации,снижениюсодержанияпигментов,что сопровождалосьувеличениемактивностиантиоксидантнойсистемы.Втожевремя привысокомуровнезагрязненияисследованныепоказателимоглисоответствовать параметрам деревьев из условно-чистого участка. Немонотонное изменение интенсивностилипопероксидацииисодержанияфотосинтетическихпигментовпри возрастанииинтенсивностиавтотранспортногозагрязнениябылопоказаноидля травянистыхрастенийнапримереодуванчикалекарственного(Taraxacum officinale Wigg.).Аналогичныеданныебылиполученыпридействиитяжелыхметаллов(Pb,Cd, Cu,Mn)иформальдегиданаперекисныйгомеостаз,содержаниепигментов,рост, атакжеустойчивостькосмотическомушокууPisum sativumL.иTriticum aestivum L. в эксперименте. Таким образом, немонотонные зависимости «доза-эффект»

могутнаблюдатьсяурастенийкакпридействиицелогокомплексаполлютантов вусловияхурбоэкосистем,такипривлиянииотдельныхтоксикантовразличной химической природы. При этом с помощью экспериментальных моделей было установлено,чтотольковобластисублетальныхдозполлютантов,вызывающих истощение адаптационного потенциала растения следует ожидать синхронное нарушениеразличныхфизиолого-биохимическихпоказателейрастения.Вобласти жеболеенизкихдозвозможноасинхронноенемонотонноеизменениепараметров состояниярастений.

ЭНДО- И ЭКЗОГЕННОЕ ДЕйСТВИЕ 2-С-МЕТИЛ-Д-ЭРИТРИТ-2,4ЦИКЛОДИФОСФАТА НА бИОСИНТЕЗ ИЗОПРЕНОИДОВ ПРОРОСТКАМИ

РЕДИСА И КЛубНЯМИ КАРТОФЕЛЯ.

Endo- and exogenic effects of 2-C-methyl-D-erythritol-2,4-cyclodiphosphate on isoprenoid biosynthesis in reddish and potato.

ИнститутБиохимииимА.Н.БахаРАНМосква,г.Москва Тел:8-495-954-44-78,Факс:8-495-954-27-32;E-mail:ershov@inbi.ras.ru 2-С-Метил-Д-эритрит-2,4-циклодифосфат(МЭЦ)являетсяцентральнымметаболитом недавнооткрытогонемевалонатногопути,используемогопластидамирастительных клетокимногимипатогеннымибактериямивкачествеединственногоисточникапри биосинтезеизопреноидов.Показано,чтовусловияхподавленияпоследнихэтапов немевалонатногопути,МЭЦвклеткахредисаиразличныхбактерийнеиспользуетсяв другихметаболическихреакциях.Приэтомегоконцентрациянеизменяется,достигая в условиях интоксикации кадмием или при действии различных окислительных агентовмиллимолярныхзначений.ФосфатазырастенийМЭЦнегидролизуют,но начинаяс4-годняонактивноиспользуетсябесцветнымиврезультатеблокированного фосмидомициномсинтезаизопреноидовпроросткамиредиса,приводякпозеленению растенийивозобновлениюсинтезахлорофиллаикаротиноидов.Показано,чтоМЭЦ можетспособствоватьтранспортуионовпереходныхметалловчерезмембраныклетки ипластидуредиса.Какэкзогенный,такисинтезированныйпластидамиМЭЦуменьшает токсичныйэффектионовпереходныхметаллов,чтопозволяетпредположитьего антистрессорную роль. На клетки возбудителя фитофтроза гриба фузариум, для которыхонявляетсячужероднымвеществом,МЭЦоказываетумеренноенегативное воздействие,независящееотконцентрациивдиапазоне0.02-15мМ.

Одновременнонаблюдаетсяконцентрационнозависимоеугнетениеиммунного ответаипроцессовтканевойрепарациивклубняхкартофеля.

ГЕНЕРАЦИЯ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА у РАСТЕНИй В уСЛОВИЯХ

ГИПОКСИЧЕСКОГО СТРЕССА: СКОРОСТЬ И МЕХАНИЗМЫ ОбРАЗОВАНИЯ,

РОЛЬ ДИОКСИДА уГЛЕРОДА

Generation of Reactive Oxygen Species under hypoxic stress in plants: rate and mechanisms of formation, role of carbon dioxide Воронежскийгосударственныйпедагогическийуниверситет,г.Воронеж Тел:(473)253-30-00,Факс:(473)255-27-27;E-mail:aershova@vspu.ac.ru Растения на разных этапах своего развития попадают в условия дефицита кислорода(гипоксия),которыесопровождаютсяповышениемвсредеконцентрации диоксида углерода. Исследовали образование разных типов АФК, активность ферментовантиоксидантовкаталазы(KAT),аскорбатпероксидазы(APO),пероксидазы (POD)илипоксигеназы(LOX)втканевыхгомогенатахиликлеточныхкомпартментах (митохондриях,хлоропластахилицитоплазме)проростковгорохаисои,помещенных на3-24часавусловиягипоксииилиСО2-среду(100%)вотсутствиисвета.

Обнаружено,чтоскоростьсвободнорадикальныхпроцессов,которуюопределяли методомхемилюминисценции,былазначительновышевовсесрокиэкспозиции в клетках проростков гороха, чем сои. Установлено, что при кратковременной гипоксииунеустойчивыхпроростковгорохапроцессыобразованиясупероксидного анион-радикала,гидропероксидови,особенно,пероксидаводородазначительно усиливались.Содержаниепероксидаводорода,впервыечасыдействиягипоксии возрастало вдвое, а при действии СО2-среды почти в 4 раза. Активность LOX, участвующейвобразованиилипопероксидов,увеличиваласьвпервыечасыдействия гипоксиииСО2-средына50-70%.Уболееустойчивыхпроростковсоисодержаниевсех типовАФК,такжекакиактивностьLOX,менялисьменеезначительновэтихусловиях.

ИсследованадинамиканакопленияАФКвхлоропластах,митохондрияхицитоплазме клетокрастенийгорохаисоивусловияхкратковременнойгипоксии.Подтверждено наличие митохондриальной LOX в проростках гороха. Обнаружено, что только митохондриальнаяформаLOXмоглаучаствоватьвнакопленииАФКвэтихорганеллах впервыечасыдействиягипоксии.Дляхлоропластнойицитоплазматическойформ LOXэтонебылохарактерно.

Выявленоналичиекорреляциимеждустепеньюустойчивостикгипоксии,скоростью образованияАФКиактивностьюантиоксидантныхферментовурастенийгорохаисои.

Показано,чтоактивностьKATурастенийсоивозрасталавпервыечасыгипоксиивбольшей степени,чемунеустойчивыхрастенийгороха.Сувеличениемэкспозициифункциизащиты вклеткахотАФКпереходиликферментампероксидазнойгруппы,активностькоторых возрастала,нотольковклеткахболееустойчивыхпроростковсои.

Отмечено,чтовысокиеконцентрацииСО2усиливаливсеэффектыгипоксиина процессыобразованияАФКвклеточныхкомпартментахиактивностьанализируемых ферментов,чторасширяетнашепредставлениеоролиСО2каксигнальноймолекулы впроцессахадаптациирастенийкусловиямгипоксическогостресса.

РЕГуЛЯЦИЯ СЕЛЕКТИВНЫМ СВЕТОМ МОРФОГЕНЕЗА ПРОРОСТКОВ

ARABIDOPSIS THALIANA

Morphogenesis of Arabidopsis thaliana seedlings under selective light Томскийгосударственныйуниверситет,г.Томск Тел:(3822)529765,Факс:(3822)529765;E-mail:feniks216@rambler.ru Растения на начальных этапах онтогенеза проявляют повышенную чувствительность к действию факторов окружающей среды. Среди внешних факторов особое положение занимает свет, который не только отвечает за реализациюфотосинтетическойфункции,ноирегулируетростиразвитиерастение.

Регуляторнаярольсветазависитнетолькоотинтенсивностиипродолжительности действия, но и спектрального состава света. В настоящее время известно, что наиболее активные участки ФАР – это синяя и красная области спектра. Менее активнымсчитаетсязеленыйсвет.

Намипроведенсравнительныйанализвлиянияпродолжительногоосвещения синим(СС)изеленымсветом(ЗС)наморфогенез4-7суточныхпроростковArabidopsis thaliana(L.)HeynhэкотипаColumbia.Вкачествеконтроляиспользовалипроростки, выращенныевтемноте(Т).Ростовыепоказатели(длинагипокотиляикорня,площадь семядолей)снималикаждыйдень,начинаясчетвертыхсуток.Длякаждоговарианта измерялипо50-60проростковвкаждойизтрехбиологическихповтороностей.

Достоверныеразличиямеждувариантами(СС,ЗСиТ)наблюдалисьна4день.

Проросткинасинемсветуформировалисамыекороткиегипокотилиикрупные семядоли относительно контрольного варианта. Зеленый свет активировал световое развитие растений, но в меньшей степени, чем синий свет. Ответная реакция корней на селективный свет была менее выражена. С увеличением возрастапроростков(от4до7дней),различиямеждупоказателямигипокотилей исемядолейусиливались,причем,вбольшейстепенидлявариантов,растущих в темноте и на синем свету. Таким образом, нами показана регуляторная роль зеленогоисинегосветананачальныхэтапахонтогенезаArabidopsis thaliana.

Работа выполнена при финансовой поддержке ФЦП «Научные и научнопедагогическиекадрыинновационнойРоссии»на2009-2013годы(П1369)иРФФИ (11-04-90732-моб_ст).

СРАВНИТЕЛЬНЫй АНАЛИЗ ТРАНСКРИПЦИИ ХЛОРОПЛАСТНОГО ГЕНОМА

ARABIDOPSIS THALIANA В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ЭНДОГЕННОГО уРОВНЯ

бРАССИНОСТЕРОИДОВ

THE COMPARATIVE ANALYSIS OF THE ARABIDOPSIS THALIANA CHLOROPLAST

GENOME TRANSCRIPTION DEPENDING ON ENDOGENOUS LEVEL OF

BRASSINOSTEROIDS

Ефимова М.В.1, Кравцов А.К.2, барташевич Д.А.2, Карначук Р.А.1, Томскийгосударственныйуниверситет,г.Томск УчреждениеРоссийскойакадемиинаукИнститутфизиологиирастений Тел:(3822)529765,Факс:(3822)529765;E-mail:stevia555@mail.ru Известно, что фитогормоны являются важным звеном для реализации не только регуляторной, но и фотосинтетической функции света. Нарушение синтеза некоторых гормонов (например, брассиностероидов, БС) или добавлениеихизвнеспособствуютпроявлениюурастенийвтемнотепризнаков деэтиоляции–укороченномугипокотилюикрупнымраскрывшимсясемядолям.

Такое фенотипическое нарушение может сопровождаться изменением и фотосинтетическогопотенциалаурастенийснизкимуровнемБС.

Спомощьюметодаrun-onтранскрипциибылаизученаскоростьтранскрипции 12хлоропластныхгеноварабидопсисвзависимостиотэндогенногоуровняБС.

Исследования выполнены на растениях Arabidopsis thaliana (L.) Heynh. экотипа Columbiaиегомутантнойформеdet2снарушеннымсинтезомБС(содержаниеБСне превышало10%отихуровнявродительскойформе).Основойтранскрипционной системыслужилилизированныехлоропласты,выделенныеизрозеточныхлистьев 3,5-недельныхрастенийарабидопсис,выращенныхнабеломсвету.Хлоропластные гены,анализируемыенами,относилиськфунционально-различнымгруппамгенов пластома.Преждевсего,этогены,продуктыкоторыхвыполняютпервостепенную роль для протекания фотосинтеза – гены фотосистемы I – psa (psaA и psaB), фотосистемыII–psb(psbA,psbDиpsbK),генбольшойсубъединицыРубиско(rbcL), АТФсинтетазногокомплекса–atp(atpB)иНАДФНдегидрогеназногокомплекса – ndhF. Среди генов“домашнего хозяйства” нами изучена транскрипция гена, кодирующегосубъединицуРНК-полимеразыбактериальноготипа(rpoB),гены16S и23SрибосомальнойРНК(rrn16иrrn23)игеныGluиTyrтранспортныхРНК(trnE-Y).

Нами отмечены значительные различия транскрипции пластидных генов у родительской и мутантной линий Arabidopsis. В целом, транскрипционная активностьвсех12изучаемыхгеновврозеточныхлистьяхdet2былазначительно выше,чемуисходнойлинии.Наибольшиеразличия(в8-12раз)отмеченыдляслабо транскрибируемыхгенов–psbK,ndhFиatpB.Длядругих9хлоропластныхгенов det2относительнаяактивностьбылав2-4разавыше,чемуродительскойлинии.

Таким образом, нами показано, что снижение эндогенного уровня брассиностероидовспособствуетусилениютранскрипциихлоропластныхгенов Arabidopsis.

Работа выполнена при частичной финансовой поддержке ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы (мероприятие 1.3.1. и 1.3.2) (Гос. контракты № П 1369 от 2 сентября 2009 г. и ) и РФФИ(моб_ст).

РОЛЬ ТИОРЕДОКСИНА И ТИОРЕДОКСИН РЕДуКТАЗЫ В ПРОЦЕССАХ

ПЕРОКСИДАЦИИ В КЛЕТКАХ КуЛЬТуРЫ ТКАНИ A. THALIANA НА НАЧАЛЬНЫХ

ЭТАПАХ ОСМОТИЧЕСКОГО СТРЕССА

Role of thioredoxin and thioredoxin reductase in peroxidation processes in A. thaliana tissue culture cells on initial stages of osmotic stress Институтботаникиим.Н.Г.ХолодногоНАНУкраины.,г.Киев,Украина Тел:(044)272-32-36.,Факс:(044)272-32-36;E-mail:sjadko@hotmail.com Тиоредоксины(ТР)этосемействонебольших(11-12кДа)протеинов,которые способны восстанавливать дисульфидные связи в белках с изменением их третичной структуры и функции. Окисленные ТР восстанавливаются в НАДФНзависимых реакциях с участием тиоредоксин редуктаз (ТРР), в так называемых ТР-ТРР системах. ТР имеют важное значение в стресс-ответах клеток в качестве модуляторовредоксстатусаиприизмененииактивностиантиоксидантных(АО), репарационныхидетоксификационныхферментов.Ранеенамибылопоказано,что приоксидативномиосмотическомстрессахукультурытканиA. thalianaпроисходит раннееувеличениесодержанияактивныхформкислорода(АФК)споследующим АФК-зависимымувеличениемактивностиТРиТРР.

Исследовали 12-14 дневную культуру ткани A. thaliana. Для изменения активности ТР или ТРР культуру перед стрессом обрабатывали раствором экзогенного ТР, ТРР или ингибитором ТРР – ауротиомалатом в течение 1 час, после чего клетки сразу в присутствии этих реагентов подвергали действию осмотического стресса (25% раствор ПЭГ 6000). Через 3 час определяли содержаниеН2О2иТБК-активныхпродуктов(ТБКАП)–показателейуровняразвития оксидативнойдеструкции(ОД).Контролембылакультураткани,такжеподвергнутая действиюстресса,нонеобработаннаяТР,ТРРилиауротиомалатом.Повторность экспериментов3-4кратная.

При действии ПЭГ у клеток культуры ткани (не обработанной ТР, ТРР или ауротиомалатом,контрольныйвариант),содержаниеН2О2иТБКАПувеличилосьна 13и6%поотношениюкисходнымуровням.Однако,уклеток,обработанныхТРиТРР, стрессорноеувеличениесодержанияН2О2иТБКАПбыловышевсреднемтолькона 7и3%.ПриингибированииТРРпроисходилозначительноеувеличениесодержания Н2О2иТБКАПна19и11%.

Такимобразом,экзогенныйТРиТРР,посредствомувеличенияактивностиТР, повышалиобщийАОстатусклеток,преждевсего,засчетувеличенияактивности АОферментов(мишенейТР),чтоприводилокснижениюстрессорногонакопления Н2О2иТБКАП.ПриингибированииТРРисоответственносниженииактивностиТР, происходилозначительноестрессорноеувеличениесодержанияН2О2иТБКАПс развитиемОД.Полученныеданныеуказываютнаважнуюредоксрегуляторную изащитнуюрольТРиТРР,направленнуюнаповышениеАОустойчивостиклеток культурытканиА. thalianaнаначальныхэтапахосмотическогостресса.

ЛИГНИФИКАЦИЯ В КуЛЬТуРЕ ТКАНИ СОСНЫ ОбЫКНОВЕННОй

Железниченко Т.В., Вараксина Т.Н., Стасова В.В., Антонова Г.Ф.

Институтлесаим.В.Н.СукачеваСОРАН,г.Красноярск Тел:(391)249-44-47,Факс:(391)243-36-86;E-mail:zhelez@mail.ru Исследовалинакоплениелигнина,егофракционныйсостав,структуру,атакже содержание низкомолекулярных метаболитов, как субстратов для биосинтеза полимеравкаллусеприразныхусловияхкультивирования.Эксплантамислужили слоиклетокразвивающейсяксилемыифлоэмыпобегов,отобранныхвсередине июля.Культивированиекаллусовпроводилинабазовойсреде1/2МС,сдобавлением аскорбиновойкислоты(0-200мг/л);2,4-дихлорфеноксиуксуснойкислоты(2,4-Д)– 4,42мг/л;1-нафтилуксуснойкислоты(НУК)–2мг/либензоаминопурина(БАП) –4,7мг/л.Культурыинкубироваливтемнотепри25°С.Составпитательнойсреды варьировали,изменяяконцентрациюсахарозы,добавляяполивинилпирролидон, феруловуюкислотуилиферуловуювсочетаниисаскорбиновойкислотой.Каллус выращиваливодномслучае–тринедели,вдругом–двамесяца,либовтемноте, либонасвету(при16ч.фотопериоде).Каллус,выращенныйвтечениетрехнедель, разделялинадвечасти,различающиесястепеньюдифференциацииклеток.

Цитологические исследования проводили методом давленых препаратов и мацерации.Препаратылигнинавыделялитиогликолевойкислотойпослеэкстракции образцов80%этанолом.Вспиртовыхэкстрактахопределялисодержаниеуглеводов, фенолов,аскорбиновой(АК)идегидроаскорбиновой(ДАК)кислот.

Количество низкомолекулярных фенольных соединений (в основном фенолкарбоновых кислот), углеводов, аскорбиновой и дегидроаскорбиновой кислот, а также содержание и структурные характеристики лигнина зависят от условий культивирования и степени дифференциации клеток каллуса.

Максимальное содержание лигнина отмечалось в дифференцированной части каллуса, культивируемого на свету с повышенной концентрацией сахарозы в средеиувеличенномвременивыращивания.Минимальное–врастущихклетках каллуса,какпринизком,такипривысокомсодержаниисахарозы.Применение поливинилпирролдона способствовало приросту каллусной биомассы и накоплениюнизкомолекулярного лигнина, особенноврастущей части каллуса.

Каллус, полученный в темноте, содержал больше низкомолекулярного лигнина именьшевысокомолекулярного.Вструктурелигнинапреобладалигваяцильные единицы при высоком содержании п-оксифенилпропановых и низком – сирингильных структур. Однако соотношение структурных единиц в лигнине каллусазависелоотусловийкультивированияистепениразвитияегоклеток.

Полученныеданныеуказываютнавозможностьрегуляциисинтезаиструктуры полимера.

ОСОбЕННОСТИ АДАПТАЦИИ РАСТЕНИй ПРОИЗРАСТАЮЩИХ НА ПОбЕРЕЖЬЕ

Peculiarity of adaptation of plants, inhabiting at coast of Lake Baikal Живетьев М.А., Граскова И.А., Дударева Л.В., Путилина Т.Е., Войников В.К.

УРАНСибирскийинститутфизиологииибиохимиирастенийСОРАН,г.Иркутск Тел:(3952)426651,Факс:(3952)510754;E-mail:nik.19@mail.ru Былаизученаактивностьрастворимыхислабосвязанныхсклеточнойстенкой пероксидаз в пробах пяти видов лекарственных растений (Achillea asiatica Serg., Taraxacum officinaleWigg.,Plantago majorL.Veronica chamaedrysL.иAlchemilla subcrenata Buser)сучетомтемпературногорежиматочексбора–вг.Иркутскинаюго-восточном побережьеоз.Байкал.Наблюдалидвапикаактивностипероксидаз–летомиосенью.



Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 7 |


Похожие работы:

«УТВЕРЖДЕНО СОГЛАСОВАНО СОВЕТ ПО ОБРАЗОВАНИЮ МИНИСТР ОБРАЗОВАНИЯ ЛЕСНОГО РАЙОНА ТВЕРСКОЙ ОБЛАСТИ ПРОТОКОЛ № 3 ОТ 25.09.2013г. _ /Н.А. Сенникова/ Заместитель председателя Совета по образованию _ 2013 г. _ Н. В. Козлова МУНИЦИПАЛЬНЫЙ ДОКЛАД СОСТОЯНИЕ И РЕЗУЛЬТАТЫ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ СИСТЕМЫ ОБРАЗОВАНИЯ ЛЕСНОГО РАЙОНА ТВЕРСКОЙ ОБЛАСТИ с. Лесное 2013 год Введение. Анализ социально-экономического и социокультурного пространства муниципального образования Лесной район находится на северо-востоке Тверской...»

«Аннотация Публичный доклад является аналитическим документом Департамента природных ресурсов и охраны окружающей среды Вологодской области о деятельности департамента по исполнению своих полномочий в 2012 году. Представление доклада является одной из основных форм реализации конституционных прав граждан на достоверную информацию о состоянии окружающей среды и природных ресурсов на территории области. В целях реализации полномочий Департаментом решаются задачи по охране и использованию водных...»

«Доклад Заработная плата в мире в 2010–2011 гг. Группа технической поддержки по вопросам достойного труда и Бюро МОТ для стран Восточной Европы и Центральной Азии Доклад Заработная плата в мире в 2010–2011 гг. Политика в области заработной платы в период кризиса Доклад Заработная плата в мире в 2010–2011 гг. Политика в области заработной платы в период кризиса Группа технической поддержки по вопросам достойного труда и Бюро МОТ для стран Восточной Европы и Центральной Азии © Международная...»

«Разоблачение опасности антидепрессантов и других психотропных препаратов доклад Гражданской комиссии по правам человека ® Оглавление 1 Оглавление Введение: 2 Защита потребителей под угрозой Глава 1: 5 Что предшествовало одобрению прозака Глава 2: 8 Потребителям не дают узнать правду Глава 3: Конфликт интересов нарастает Глава 4: Использование Закона о свободе информации для получения фактов Глава 5: Сокрытие признаков ломки Глава 6: Психиатрические препараты приводят к насилию в школах и...»

«ИЗУЧЕНИЕ ФЕНОМЕНА ВРЕМЕНИ МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ имени М.В.ЛОМОНОСОВА МОСКОВСКОЕ ОБЩЕСТВО ИСПЫТАТЕЛЕЙ ПРИРОДЫ WEB-ИНСТИТУТ ИССЛЕДОВАНИЙ ПРИРОДЫ ВРЕМЕНИ АГЕНТСТВО НАЦИОНАЛЬНЫХ КОММУНИКАЦИОННЫХ СТРАТЕГИЙ ФОНД ИМЕНИ РЕВОЛЬТА ИВАНОВИЧА ПИМЕНОВА продолжают работу Российского междисциплинарного семинара по темпорологии. В работе семинара принимают участие специалисты-дисциплинарии, специалисты-междисциплинарии, аспиранты и студенты. В весеннем семестре 2014 года заседания семинара...»

«Духоборы в Грузии: Исследование Вопроса Земельной Собственности и Межэтнических Отношений в районе Ниноцминда Хедвиг Лом Европейский центр по делам меньшинств, рабочий доклад #35 Ноябрь 2006 EUROPEAN CENTRE FOR MINORITY ISSUES (ECMI) ECMI Headquarters: Schiffbruecke 12 (Kompagnietor) D-24939 Flensburg Germany +49-(0)461-14 14 9-0 fax +49-(0)461-14 14 9-19 Internet: http://www.ecmi.de ECMI Tbilisi office: 16 Paliashvili St, 2nd Floor, 0179 Tbilisi, Georgia. (32) 223 833 ECMI Akhalkalaki office:...»

«Санкт-Петербургский государственный университет Высшая школа менеджмента НАУЧНЫЕ ДОКЛАДЫ К.В. Кротов НАПРАВЛЕНИЯ РАЗВИТИЯ КОНЦЕПЦИИ УПРАВЛЕНИЯ ЦЕПЯМИ ПОСТАВОК № 14 (R)–2010 Санкт-Петербург 2010 К.В. Кротов. Направления развития концепции управления цепями поставок. Научный доклад № 14 (R)–2010. СПб.: ВШМ СПбГУ, 2010. Ключевые слова и фразы: управление цепями поставок, управление цепями спроса, логистика. Управление цепями поставок является одной из эффективных стратегий создания конкурентных...»

«Изменение климата и возможности низкоуглеродной энергетики в России Общественный доклад 2012 2 Изменение климата и возможности низкоуглероднойэнергетики в России. – М. РСоЭС, 2012 Этот материал подготовлен рабочей группой по климату и энергетике Российского Социально-Экологического Союза и участниками проекта Декоматом для привлечения внимания общественности к проблеме изменения климата, проблеме последствий использовании ископаемого топлива, рисков и опасностей атомной энергетики, В брошюре...»

«Министерство образования Тульской области ПУБЛИЧНЫЙ ДОКЛАД ГОСУДАРСТВЕННОГО ОБРАЗОВАТЕЛЬНОГО УЧРЕЖДЕНИЯ НАЧАЛЬНОГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ ТУЛЬСКОЙ ОБЛАСТИ ПРОФЕССИОНАЛЬНОЕ УЧИЛИЩЕ № 17 Директор - Ушакова Г.В. АЛЕКСИН – 2014 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ. Раздел I. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ ОБ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОМ УЧРЕЖДЕНИИ Раздел II. УСЛОВИЯ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА.. 11 Раздел III. ОСОБЕННОСТИ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА Раздел IV. РЕЗУЛЬТАТЫ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ, КАЧЕСТВО ОБРАЗОВАНИЯ Раздел V....»

«Pragmatic Perl 10 pragmaticperl.com Выпуск 10. Декабрь 2013 Другие выпуски и форматы журнала всегда можно загрузить с http://pragmaticperl. com. С вопросами и предложениями пишите на editor@pragmaticperl.com. Комментарии к каждой статье есть в htmlверсии. Подписаться на новые выпуски можно по ссылке pragmaticperl.com/subscribe. Авторы статей: Сергей Романов, Сергей Можайский, Владимир Леттиев Корректор: Андрей Шитов Выпускающий редактор: Вячеслав Тихановский (vti) Ревизия: 2013-12-04 07:37 ©...»

«МУНИЦИПАЛЬНОЕ ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЛИЦЕЙ №4 ОТКРЫТЫЙ ИНФОМАЦИОННО-АНАЛИТИЧЕСКИЙ ДОКЛАД О СОСТОЯНИИ И РЕЗУЛЬТАТАХ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОГО УЧРЕЖДЕНИЯ Таганрог- 2012 1 Содержание 1. Введение. 2. Общая характеристика образовательного учреждения (краткая история; миссия; общее количество учащихся, учителей; помещение, его характеристика). Характеристика и результаты образовательной системы. 3. Характеристика и результаты воспитательной системы. 4. Характеристика ресурсов...»

«ДОКЛАДЫ ПЕРЕСЛАВЛЬ-ЗАЛЕССКОГО НАУЧНО-ПРОСВЕТИТЕЛЬНОГО ОБЩЕСТВА ВЫПУСК 7 Фауна позвоночных Переславского уезда Москва 2003 ББК 28.693.3(235.44) Д 63 Издание подготовлено ПКИ — Переславской Краеведческой Инициативой. Редактор А. Ю. Фоменко. Д 63 Доклады Переславль-Залесского Научно-Просветительного Общества. — М.: MelanarЁ, 2003. — Т. 7. — 26 с. Статья В. А. Варенцова показывает фауну Переславского края. Указываются животные, которые теперь уже не встречаются в окрестностях Переславля, а также...»

«МОСКОВСКИЙ ЦЕНТР КАРНЕГИ Владимир Милов, Иван Селивахин ПРОБЛЕМЫ ЭНЕРГЕТИЧЕСКОЙ ПОЛИТИКИ Рабочие материалы № 4, 2005 Москва Серия Рабочие материалы основана в 1999 г. © Carnegie Endowment for International Peace, 2005 Полная или частичная перепечатка данной публикации возможна только с письменного согласия Московского Центра Карнеги. При цитировании ссылка на издание обязательна. Московский Центр Карнеги Россия, 125009 Москва, Тверская ул., 16/2. Тел.: (095) 935-8904. Факс: (095) 935-8906. Эл....»

«0 ФОНД РАЗВИТИЯ ГРАЖДАНСКОГО ОБЩЕСТВА ОГЛАВЛЕНИЕ 1 ФОНД РАЗВИТИЯ ГРАЖДАНСКОГО ОБЩЕСТВА ТРАДИЦИОННЫЕ МЕДИА В 2020 ГОДУ: ТЕНДЕНЦИИ И ПРОГНОЗЫ Условным горизонтом прогноза в этом докладе выбран 2020 год, до которого остается менее семи лет. И если в масштабе истории этот срок можно посчитать 2 незначительным, то для отрасли медиа, стремительно меняющейся под воздействием новых технологий и Интернета, ближайшие годы могут стать определяющими во всем ее дальнейшем развитии. Для иллюстрации этого...»

«Александр Неклесса КРИЗИС СОВРЕМЕННОГО МИРА: НОВЫЕ ФОРМЫ СОЦИАЛЬНОСТИ СЕМИНАР КРИЗИС СОВРЕМЕННОГО МИРА И НОВЫЕ ФОРМЫ СОЦИАЛЬНОСТИ ББК 87.68 УДК 008 Н 54 Кормчий Вселенной, словно бы отпустив кормило, отошел на наблюдательный пост, космос же продолжал вращаться под воздействием судьбы и врожденного вожделения. Когда же он отделился от Кормчего, то в ближайшее время вершил путь прекрасно; по истечении же времени и приходе забвения им овладевает древний беспорядок, так что, в конце концов,...»

«АНАЛИТИЧЕСКИЙ ДОКЛАД МИНИСТЕРСТВА ФИЗИЧЕСКОЙ КУЛЬТУРЫ, СПОРТА И ТУРИЗМА ОРЕНБУРГСКОЙ ОБЛАСТИ О состоянии и развитии физической культуры и спорта в Оренбургской области за 2012 год 2 Содержание 1. Организационная работа стр. 4 1.1. Работа Оренбургской областной организации профессионального союза работников физической культуры, спорта и туризма РФ стр. 12 2. Организация работы с физкультурными кадрами стр. 13 3. Организация процесса физического воспитания в дошкольных образовательных...»

«Согласован с Советом гимназии протокол от 27.08.2013г. № 3 Председатель Совета гимназии _А.В.Бритвина УТВЕРЖДЁН УТВЕРЖДАЮ на педагогическом совете Директор МОУ гимназии № 5 МОУ гимназии № 5 протокол № 1 от 26.08. 2013 г. _М.А.Железнякова приказ от 26.08.2013 г. № Публичный доклад (сентябрь, 2013 год) 1 Публичный ежегодный доклад муниципального общеобразовательного учреждения гимназии № 5 Ворошиловского района г. Волгограда за 2013 год (сентябрь) Введение Появление нового социального и...»

«ПЛЕНАРНЫЕ ДОКЛАДЫ ДРЕВНИЙ ВУЛКАНИЗМ ЗОНЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ПАЛЕОАЗИАТСКИЙ ОКЕАН СИБИРСКИЙ ПАЛЕОКОНТИНЕНТ: ГЕОТЕКТОНИЧЕСКИЕ ОБСТАНОВКИ И ПАЛЕОГЕОДИНАМИЧЕСКИЕ РЕКОНСТРУКЦИИ В.А. Верниковский, А.Е. Верниковская, Д.В. Метелкин Институт нефтегазовой геологии и геофизики им. А.А.Трофимука СО РАН, Новосибирск, e-mail: vernikovskyva@ipgg.nsc.ru Исследования геологического строения складчатых поясов в северо-западном, западном и юго-западном обрамлении Сибирского кратона и разработка палеогеодинамических...»

«Источник: ИС ПАРАГРАФ, 17.07.2014 13:03:32 ЗАКОН РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН О правоохранительной службе Настоящий Закон регулирует общественные отношения, связанные с поступлением на правоохранительную службу Республики Казахстан, ее прохождением и прекращением, а также определяет правовое положение (статус), материальное обеспечение и социальную защиту сотрудников правоохранительных органов Республики Казахстан. Глава 1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ Статья 1. Основные понятия, используемые в настоящем Законе В...»

«Изменение климата, 2001 г. Обобщенный доклад Обобщенный доклад Оценка Межправительственной группы экспертов по изменению климата Нижеследующий доклад, утвержденный по каждому пункту на пленарной восемнадцатой сессии МГЭИК, состоявшейся в Уэмбли (Соединенное Королевство) 24-29 сентября 2001 года, представляет собой официальное согласованное заключение МГЭИК по ключевым выводам и неопределенностям, содержащимся в документах рабочей группы, представленных в качестве вклада в подготовку Третьего...»








 
2014 www.av.disus.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.